【摘 要】
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为探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对玉米赤霉烯酮(ZEA)致睾丸支持细胞(SCs)乳酸下降的保护效应,试验以Wistar大鼠原代睾丸支持细胞为材料,在采用CCK-8法确定ZEA及NAC处理细胞浓度的基础上,试验设对照组、ZEA组、NAC组及ZEA+NAC组,用乳酸测试盒检测各组SCs产生的乳酸含量;丙酮酸测试盒检测SCs中丙酮酸的含量;Western-blot检测SCs乳酸代谢中相关蛋白的表达情况.结果显示,CCK-8法确定的NAC保护ZEA致SCs乳酸下降保护效应试验中所采用的ZEA和NAC处理细胞的浓度
【机 构】
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扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009;扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009
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为探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对玉米赤霉烯酮(ZEA)致睾丸支持细胞(SCs)乳酸下降的保护效应,试验以Wistar大鼠原代睾丸支持细胞为材料,在采用CCK-8法确定ZEA及NAC处理细胞浓度的基础上,试验设对照组、ZEA组、NAC组及ZEA+NAC组,用乳酸测试盒检测各组SCs产生的乳酸含量;丙酮酸测试盒检测SCs中丙酮酸的含量;Western-blot检测SCs乳酸代谢中相关蛋白的表达情况.结果显示,CCK-8法确定的NAC保护ZEA致SCs乳酸下降保护效应试验中所采用的ZEA和NAC处理细胞的浓度分别为20 μmol/L和10 μmol/L.与对照组相比,ZEA组SCs细胞内外乳酸及丙酮酸含量呈极显著下降(P＜0.01);与ZEA组相比,NAC+ZEA组中细胞产生的乳酸含量上升但不显著(P＞0.05),丙酮酸含量显著上升(P＜0.05).Western-blot结果显示,与对照组相比,ZEA组SCs细胞乳酸产生相关蛋白LDHA、MCT4表达量均显著下降(P＜0.05),GLUT1呈现极显著下降趋势(P＜0.01);与ZEA组相比,NAC+ZEA组中GLUT1蛋白表达量呈显著上升(P＜0.05).结果表明,NAC主要通过上调GLUT1蛋白表达量来缓解ZEA诱导的SCs乳酸代谢中丙酮酸含量下降的现象,从而恢复SCs对生殖细胞的能量供给.
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