稳定表达人白细胞介素2肝干细胞系的建立

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenlinwu
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目的:通过逆转录病毒介导,建立能稳定高效表达白介素2的肝干细胞WB-F344。方法:构建逆转录病毒载体Plpcx-IL-2质粒,转染包装细胞PT67,收集细胞培养上清,检测病毒的滴度。将高滴度的PT67/Plpcx-IL-2病毒液感染肝干细胞WB-F344,用嘌呤霉素加压筛选出抗性克隆,并用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫组化实验和Western blot实验证实抗性细胞在转录水平和蛋白水平均有白介素2的表达情况。结果:成功构建含白介素2的逆转录病毒载体,获得滴度为105CFU/ml的感染性病毒液。建立的细胞系在转录水平和蛋白水平均有白介素2的表达。结论:成功建立了稳定表达人白细胞介素2的肝干细胞系WB-F344/Plpcx-IL-2,为下一步开展研究以肝干细胞为载体肝癌免疫基因治疗奠定了基础。
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