【摘 要】
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目的:探讨金乌健骨胶囊对类风湿关节炎成纤维样滑膜(RA-FLS)细胞增殖、迁移及凋亡的影响.方法:采用组织块贴壁法分离培养RA-FLS细胞,HE染色和免疫化学法鉴定细胞.根据含药血清比例将细胞分为空白对照组,兔血清对照组,金乌健骨胶囊含药血清高、中、低剂量组和来氟米特对照组.CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Western Blot检测Caspase8和Caspase3蛋白表达水平,ELISA检测TNF-α、TNFR1的分泌.结果:组织块法分离培养的细胞为RA-FLS.与空白组比较,不同浓度
【机 构】
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贵州中医药大学,贵阳550001;贵州中医药大学第二附属医院,贵阳550001
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目的:探讨金乌健骨胶囊对类风湿关节炎成纤维样滑膜(RA-FLS)细胞增殖、迁移及凋亡的影响.方法:采用组织块贴壁法分离培养RA-FLS细胞,HE染色和免疫化学法鉴定细胞.根据含药血清比例将细胞分为空白对照组,兔血清对照组,金乌健骨胶囊含药血清高、中、低剂量组和来氟米特对照组.CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Western Blot检测Caspase8和Caspase3蛋白表达水平,ELISA检测TNF-α、TNFR1的分泌.结果:组织块法分离培养的细胞为RA-FLS.与空白组比较,不同浓度金乌健骨胶囊24、48 h能抑制RA-FLS增殖(P＜0.05).与兔血清对照组比较,金乌健骨胶囊各剂量组抑制RA-FLS伤口愈合(P＜0.05),下调Caspase8、Caspase3蛋白表达(P＜0.05),下调细胞培养上清中TNF-α浓度(P＜0.05),上调TNFR1浓度(P＜0.05).其中金乌健骨胶囊高剂量组各指标优于来氟米特对照组(P＜0.05).结论:金乌健骨胶囊通过抑制RA患者FLS细胞TNF-α分泌,促进TNFR1的分泌,增加Caspase8、Caspase3蛋白表达,正向调节RA-FLS细胞凋亡,抑制RA-FLS增殖和迁移.
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