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【摘要】：辽东楤木作为重要的食药两用植物，苗木繁育技术直接关系到其栽培的规模化发展。本文详细介绍了辽东楤木播种育苗和组织培养技术研究现状，旨在为辽东楤木苗木繁育技术研究提供借鉴和参考。
【关键词】：辽东楤木；种子；根孽繁殖
辽东楤木（Aralia clate （Miq.）seem） ，系五加科木属灌叶灌木，又名刺嫩芽、龙芽楤木、刺龙芽、刺老芽、树头菜、虎阳刺等，是食药两用植物，其嫩芽是著名的山珍野菜， 味道清香鲜美， 营养丰富， 素有“ 天下第一山珍” 之美称，根皮与树皮是传统中医药材，具有补气安神，活血祛风，利湿消肿之作用，用于治疗神经衰弱、肾虚阳痿、风湿痹痛、跌打损伤、胃十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃痉挛、肝炎、糖尿病、肾炎、水肿等疾病。在国外，辽东楤木主要分布于俄罗斯、日本、韩国。在我国，辽东楤木广泛分布于辽宁、吉林和黑龙江等东北山区和山东、河北等地，多生于海拔1000米以下林缘、灌丛中，以山坡、沟谷多见。自上世纪90 年代初，辽东楤木芽菜大量出口日本等地，由于过分采挖，对东北林区野生辽东楤木资源造成严重破坏，加之人们越来越认识到山野菜的营养和健康价值，其需求越来越大，开展辽东楤木人工栽培成为必然趋势。优质壮苗是辽东楤木人工栽培的关键。因此，开展辽东楤木苗木繁育技术研究，对于完善辽东楤木人工栽培技术体系、扩大资源数量和芽菜的产量有重要的意义， 也是保扩野生资源，满足社会需求的必由之路[1-3]。
1.辽东楤木播种育苗技术研究进展
辽东楤木播种育苗已有成熟技术，东北地区种子采收以9月中、下旬至10月果实成熟为宜。播种前，种子需要经过层积处理，将干藏种子用冷水浸泡48h， 每12h换水1 ～ 2次， 然后用1%CuSO4 溶液消毒3h， 清水冲洗后混以5 倍细沙（湿度60%左右）层积4个月。层积过程中首先在温室进行日变温处理（8 ～ 25 ℃）条件下放置35 ～ 40 d， 每天翻动， 控制温湿度。当个别种子发芽时转入冰箱（4 ℃）， 低温条件下3个月左右， 每隔1周翻动1次以控制湿度。播种方法以床面撒播为主，播种量以单位面积产苗量计算播种量， 每平方米育苗300株为宜。苗期管理注意适时浇水、施肥、除草、间苗和病虫害防治[4，5]。辽东惚木种子活力较高，但种子萌发率很低或不萌发，其原因是辽东惚木种子内部存在抑制萌发物质，而且采收时种胚的形态和结构尚未发育完全， 存在严重休眠现象。因此，辽东楤木播种育苗技术的难点在其种子西药打破休眠。早在1961年，李英沫等就已建立起辽东楤木解除休眠的方法，即在层积处理前将种子浸在冷水中2d，变温处理30 天（ 种沙度每天保持在15 ℃～ 25 ℃ ， 25 ℃ 8 小时/天，15℃16 小时/天）， 低温处理80天（ 种沙温度1℃ ～ 3 ℃ ） 每天翻动种子， 保持湿润。经过这种处理，辽东楤木干种子的发芽率可达62.2%[6]。随后，大批学者开展了打破辽东楤木种子休眠的研究，宁明明、田晓艳等人研究表明，200 mg /L GA3丙酮溶液中浸泡12 h处理，种子的萌发率显著提高，再配合变温处理可进一步提高其萌发率。宁明明进一步研究表明在GA3浓度与变温环境一定下，将种子子叶部分切除约1 /3 ，辽东楤木种子萌发率达到56～70%。基于此，宁明明建立起辽东楤木种子打破休眠技术，即龙芽楤木种子在GA3浓度为200 mg /L、子叶切去1 /3、变温条件为12 h 25 ℃ /12 h 5 ℃下萌发率最佳，萌发率可达56～70%。而田晓艳报道了200 mg/LGA3 丙酮溶液中浸泡12 h， 再进行变温层积处理30 d（高温20 ～ 23 ℃12 h， 低温0 ～ 4 ℃ 12 h）， 辽东楤木种子萌发率高达84%[7，8]。沈阳农业大学的宁伟、李宏博等人开展了GA3 对辽东楤木种子在变温层积条件下解除休眠过程中部分信号分子变化和呼吸代谢途径关键酶的活性变化，揭示了GA3+层积处理解除辽东楤木种子休眠的生理生化机理。李宏博的研究表明200 m g /L的GA3丙酮溶液可以显著降低种子内源ABA 含量；显著提高种子内源GA 含量、CaM 含量和NADKase、质膜Ca2 +-ATPase 活性， 表明辽东楤木种子解除休眠过程中有信号分子的参与调节。推测其过程为外源GA3 在丙酮的作用下进入种子内部并打破休眠种子内部原有的GA /ABA 平衡， 然后通过对C aM、NADK 等胞内信号分子的调控， 改变NADP /NAD的相对含量和启动种子的呼吸代谢过程，为种胚形态和结构的继续发育提供了呼吸基质或原料， 最终促进种子在适宜条件下的萌发[9，10]。宁伟的研究表明辽东楤木种子经200 mgL- 1 GA3的丙酮溶液浸泡种子12 h， 其α-淀粉酶活性和可溶性糖的含量显著提高，种子在后熟过程中主要以糖酵解和三羧酸循环作为供能形式， 表明磷酸戊糖途径的活化对解除种子休眠起到至关重要的作用[11，12]。
2. 辽东楤木无性繁殖技术研究进展
2.1 辽东楤木根繁技术研究进展
辽东楤木根段繁殖具有方法简便、成本低、苗木质量好的优点，因此生产上常采用此方法繁育苗木。张淑雁等研究了根段对辽东楤木根繁的影响，结果表明栽植根段的最佳规格为根段径级0 .4 ～ 0 .6cm，根段长10 ～ 12cm ， 采用1 000mg/kg 的ABT 生根粉浸泡1h ， 其成苗率可达96 %[13]。张宝艳等研究了环境对辽东楤木根繁的影響，结果表明采用底床直插并配以GA3处理的方法可使辽东楤木根繁成苗率达到90%以上，能满足生产需要[14]。另外，耿翠芳系统研究了辽东楤木细根段育苗技术，其采用的细根段来自于辽东楤木常规粗根段育苗中剪下的“废根” ，从中挑选出直径在0 .2-0.4cm 之间，根段截取长度在9cm 以上，并混沙催芽结合地膜覆盖，可使辽东楤木细根出苗率达到36 .5 %。另外，其试验还观察到辽东楤木细根段育苗时发芽位置不显示极性， 表明不定芽不只发生在根的生物学上端， 也发生在生物学的下端， 而且上、下两端的不定芽发生几率无明显差异[15]。 2.2 辽东楤木组织培养技术研究进展
辽东楤木组织培养技术从上世纪90年代开展至今已比较成熟。早在1990年，李甫永等就已经建立起辽东惚木试管苗快速繁殖技术，获得了辽东楤木胚状体。另外，其研究发现可通过试管苗的再行繁殖获得大量植株。试验与生产实践证明， 培养再生4 ～ 5 个月在根茎基部逐渐膨大， 形成许多绿色瘤状突起， 进而分化出大量绿芽， 数量可多达几十个[16]。其后，大批学者开展了辽东楤木组织培养技术研究，魏健等的研究表明，以叶片为外植体诱导愈伤组织效果最佳，最适诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 1.0 mg/L，叶片诱导率高达36.7%；最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 1.5 mg/L；最适分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 0.5 mg/L，平均诱导分化率达85.0%。该研究建立的刺嫩芽快繁体系，试管苗驯化率可达85.0%，具有一定的推广与应用价值[17]。常迺滔等以MS为基本培养基，辽东楤木茎尖＼茎为外植体，再配以不同的激素处理，建立起辽东楤木组织培养技术体系。辽东楤木离体培养以MS为基本培养基配以最佳激素配比NAA0.01mg/L+6-BA 0.5 mg/L、NAA0.02 mg/L +6-BA0.5 mg/L和NAA0.01 mg/L +IBA1.5 mg/L，辽东楤木愈伤组织诱导率、分化率和再生植株成活率分别达94%、22.5%和98%，且繁育出的再生植株生长势强，每株苗分化出的根数多，定植后的成活率也较高[3]。同样，赵恒田、姬惜珠等以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽、叶片、叶柄、嫩茎、根等为外植体， 以MS 为基本培养基， 附加不同种类和浓度的植物生长调节物质均建立起辽东楤木组织培养技术体[18，19]。而李正楠等建立起辽东楤木的体细胞胚胎发生技术，其利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材， 研究了2， 4-D 、6-BA 、NAA 、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。辽东楤木体细胞胚胎发生最适外植体为嫩茎， 诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根，胚性愈伤组织诱导率93 .56 %；胚状体诱导率62 .41%； 6-BA 为辽东楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L 作碳源， 芽分化最适培养基为MS +6-BA 1 .0 mg/L +NAA 0 .02 mg/ L；成苗最適培养基为MS +6-BA 1 .0 mg/L +NAA 0 .04 mg/L ， 芽分化率和成苗率达88.02%和79 .62 %[20]。
综述所述，辽东楤木苗木繁育技术已经比较成熟，突破了播种育苗需要打破种子休眠关键技术，建立起整套的组织培养技术体系。但是鉴于组织培养技术难度较高、成本较高，生产上仍以播种育苗为主。另外，在辽东楤木无性繁殖技术上，除了组织培养技术外，应加大根繁、扦插等技术的研究，尽早建立起完善的辽东楤木无性繁育技术体系，为生产提供更多的实用技术。
【参考文献】：
[1].侯集瑞，杨世海，孙晓波，等。辽东楤木的研究进展[J]。特产研究，2000，4：51-55）
[2].李建华， 王迎， 张迎辉，等。辽东楤木苗期生物学特性的研究[J]。山东林业科技，2006，2：13-15）
作者简介：曲畅（1988年12月8日）女，大学（学士），助理工程师，从事青山及森林资源保护工作。
【关键词】：辽东楤木；种子；根孽繁殖
辽东楤木（Aralia clate （Miq.）seem） ，系五加科木属灌叶灌木，又名刺嫩芽、龙芽楤木、刺龙芽、刺老芽、树头菜、虎阳刺等，是食药两用植物，其嫩芽是著名的山珍野菜， 味道清香鲜美， 营养丰富， 素有“ 天下第一山珍” 之美称，根皮与树皮是传统中医药材，具有补气安神，活血祛风，利湿消肿之作用，用于治疗神经衰弱、肾虚阳痿、风湿痹痛、跌打损伤、胃十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃痉挛、肝炎、糖尿病、肾炎、水肿等疾病。在国外，辽东楤木主要分布于俄罗斯、日本、韩国。在我国，辽东楤木广泛分布于辽宁、吉林和黑龙江等东北山区和山东、河北等地，多生于海拔1000米以下林缘、灌丛中，以山坡、沟谷多见。自上世纪90 年代初，辽东楤木芽菜大量出口日本等地，由于过分采挖，对东北林区野生辽东楤木资源造成严重破坏，加之人们越来越认识到山野菜的营养和健康价值，其需求越来越大，开展辽东楤木人工栽培成为必然趋势。优质壮苗是辽东楤木人工栽培的关键。因此，开展辽东楤木苗木繁育技术研究，对于完善辽东楤木人工栽培技术体系、扩大资源数量和芽菜的产量有重要的意义， 也是保扩野生资源，满足社会需求的必由之路[1-3]。
1.辽东楤木播种育苗技术研究进展
辽东楤木播种育苗已有成熟技术，东北地区种子采收以9月中、下旬至10月果实成熟为宜。播种前，种子需要经过层积处理，将干藏种子用冷水浸泡48h， 每12h换水1 ～ 2次， 然后用1%CuSO4 溶液消毒3h， 清水冲洗后混以5 倍细沙（湿度60%左右）层积4个月。层积过程中首先在温室进行日变温处理（8 ～ 25 ℃）条件下放置35 ～ 40 d， 每天翻动， 控制温湿度。当个别种子发芽时转入冰箱（4 ℃）， 低温条件下3个月左右， 每隔1周翻动1次以控制湿度。播种方法以床面撒播为主，播种量以单位面积产苗量计算播种量， 每平方米育苗300株为宜。苗期管理注意适时浇水、施肥、除草、间苗和病虫害防治[4，5]。辽东惚木种子活力较高，但种子萌发率很低或不萌发，其原因是辽东惚木种子内部存在抑制萌发物质，而且采收时种胚的形态和结构尚未发育完全， 存在严重休眠现象。因此，辽东楤木播种育苗技术的难点在其种子西药打破休眠。早在1961年，李英沫等就已建立起辽东楤木解除休眠的方法，即在层积处理前将种子浸在冷水中2d，变温处理30 天（ 种沙度每天保持在15 ℃～ 25 ℃ ， 25 ℃ 8 小时/天，15℃16 小时/天）， 低温处理80天（ 种沙温度1℃ ～ 3 ℃ ） 每天翻动种子， 保持湿润。经过这种处理，辽东楤木干种子的发芽率可达62.2%[6]。随后，大批学者开展了打破辽东楤木种子休眠的研究，宁明明、田晓艳等人研究表明，200 mg /L GA3丙酮溶液中浸泡12 h处理，种子的萌发率显著提高，再配合变温处理可进一步提高其萌发率。宁明明进一步研究表明在GA3浓度与变温环境一定下，将种子子叶部分切除约1 /3 ，辽东楤木种子萌发率达到56～70%。基于此，宁明明建立起辽东楤木种子打破休眠技术，即龙芽楤木种子在GA3浓度为200 mg /L、子叶切去1 /3、变温条件为12 h 25 ℃ /12 h 5 ℃下萌发率最佳，萌发率可达56～70%。而田晓艳报道了200 mg/LGA3 丙酮溶液中浸泡12 h， 再进行变温层积处理30 d（高温20 ～ 23 ℃12 h， 低温0 ～ 4 ℃ 12 h）， 辽东楤木种子萌发率高达84%[7，8]。沈阳农业大学的宁伟、李宏博等人开展了GA3 对辽东楤木种子在变温层积条件下解除休眠过程中部分信号分子变化和呼吸代谢途径关键酶的活性变化，揭示了GA3+层积处理解除辽东楤木种子休眠的生理生化机理。李宏博的研究表明200 m g /L的GA3丙酮溶液可以显著降低种子内源ABA 含量；显著提高种子内源GA 含量、CaM 含量和NADKase、质膜Ca2 +-ATPase 活性， 表明辽东楤木种子解除休眠过程中有信号分子的参与调节。推测其过程为外源GA3 在丙酮的作用下进入种子内部并打破休眠种子内部原有的GA /ABA 平衡， 然后通过对C aM、NADK 等胞内信号分子的调控， 改变NADP /NAD的相对含量和启动种子的呼吸代谢过程，为种胚形态和结构的继续发育提供了呼吸基质或原料， 最终促进种子在适宜条件下的萌发[9，10]。宁伟的研究表明辽东楤木种子经200 mgL- 1 GA3的丙酮溶液浸泡种子12 h， 其α-淀粉酶活性和可溶性糖的含量显著提高，种子在后熟过程中主要以糖酵解和三羧酸循环作为供能形式， 表明磷酸戊糖途径的活化对解除种子休眠起到至关重要的作用[11，12]。
2. 辽东楤木无性繁殖技术研究进展
2.1 辽东楤木根繁技术研究进展
辽东楤木根段繁殖具有方法简便、成本低、苗木质量好的优点，因此生产上常采用此方法繁育苗木。张淑雁等研究了根段对辽东楤木根繁的影响，结果表明栽植根段的最佳规格为根段径级0 .4 ～ 0 .6cm，根段长10 ～ 12cm ， 采用1 000mg/kg 的ABT 生根粉浸泡1h ， 其成苗率可达96 %[13]。张宝艳等研究了环境对辽东楤木根繁的影響，结果表明采用底床直插并配以GA3处理的方法可使辽东楤木根繁成苗率达到90%以上，能满足生产需要[14]。另外，耿翠芳系统研究了辽东楤木细根段育苗技术，其采用的细根段来自于辽东楤木常规粗根段育苗中剪下的“废根” ，从中挑选出直径在0 .2-0.4cm 之间，根段截取长度在9cm 以上，并混沙催芽结合地膜覆盖，可使辽东楤木细根出苗率达到36 .5 %。另外，其试验还观察到辽东楤木细根段育苗时发芽位置不显示极性， 表明不定芽不只发生在根的生物学上端， 也发生在生物学的下端， 而且上、下两端的不定芽发生几率无明显差异[15]。 2.2 辽东楤木组织培养技术研究进展
辽东楤木组织培养技术从上世纪90年代开展至今已比较成熟。早在1990年，李甫永等就已经建立起辽东惚木试管苗快速繁殖技术，获得了辽东楤木胚状体。另外，其研究发现可通过试管苗的再行繁殖获得大量植株。试验与生产实践证明， 培养再生4 ～ 5 个月在根茎基部逐渐膨大， 形成许多绿色瘤状突起， 进而分化出大量绿芽， 数量可多达几十个[16]。其后，大批学者开展了辽东楤木组织培养技术研究，魏健等的研究表明，以叶片为外植体诱导愈伤组织效果最佳，最适诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 1.0 mg/L，叶片诱导率高达36.7%；最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 1.5 mg/L；最适分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 0.5 mg/L，平均诱导分化率达85.0%。该研究建立的刺嫩芽快繁体系，试管苗驯化率可达85.0%，具有一定的推广与应用价值[17]。常迺滔等以MS为基本培养基，辽东楤木茎尖＼茎为外植体，再配以不同的激素处理，建立起辽东楤木组织培养技术体系。辽东楤木离体培养以MS为基本培养基配以最佳激素配比NAA0.01mg/L+6-BA 0.5 mg/L、NAA0.02 mg/L +6-BA0.5 mg/L和NAA0.01 mg/L +IBA1.5 mg/L，辽东楤木愈伤组织诱导率、分化率和再生植株成活率分别达94%、22.5%和98%，且繁育出的再生植株生长势强，每株苗分化出的根数多，定植后的成活率也较高[3]。同样，赵恒田、姬惜珠等以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽、叶片、叶柄、嫩茎、根等为外植体， 以MS 为基本培养基， 附加不同种类和浓度的植物生长调节物质均建立起辽东楤木组织培养技术体[18，19]。而李正楠等建立起辽东楤木的体细胞胚胎发生技术，其利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材， 研究了2， 4-D 、6-BA 、NAA 、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。辽东楤木体细胞胚胎发生最适外植体为嫩茎， 诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根，胚性愈伤组织诱导率93 .56 %；胚状体诱导率62 .41%； 6-BA 为辽东楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L 作碳源， 芽分化最适培养基为MS +6-BA 1 .0 mg/L +NAA 0 .02 mg/ L；成苗最適培养基为MS +6-BA 1 .0 mg/L +NAA 0 .04 mg/L ， 芽分化率和成苗率达88.02%和79 .62 %[20]。
综述所述，辽东楤木苗木繁育技术已经比较成熟，突破了播种育苗需要打破种子休眠关键技术，建立起整套的组织培养技术体系。但是鉴于组织培养技术难度较高、成本较高，生产上仍以播种育苗为主。另外，在辽东楤木无性繁殖技术上，除了组织培养技术外，应加大根繁、扦插等技术的研究，尽早建立起完善的辽东楤木无性繁育技术体系，为生产提供更多的实用技术。
【参考文献】：
[1].侯集瑞，杨世海，孙晓波，等。辽东楤木的研究进展[J]。特产研究，2000，4：51-55）
[2].李建华， 王迎， 张迎辉，等。辽东楤木苗期生物学特性的研究[J]。山东林业科技，2006，2：13-15）
作者简介：曲畅（1988年12月8日）女，大学（学士），助理工程师，从事青山及森林资源保护工作。