微波预处理对油菜秸秆纤维素糖化的影响

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bechametop
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  摘要[目的]考察微波预处理对油菜秸秆纤维素糖化的影响并优化处理工艺。[方法]以油菜秸秆为材料,采用单因素试验研究了微波处理功率、时间、液固比、pH及纤维素酶酶量、酶解时间等处理条件对产糖率的影响,并应用响应面分析法就预处理工艺进行优化,利用Design Expert 8.0.5b软件分析试验数据建立纤维素转化条件的二次项数学模型。[结果]试验表明,产糖率的模型均极显著(P<0000 1),拟合度良好。微波预处理对油菜秸秆纤维素糖化的适宜工艺条件:微波功率560 W,微波时间7.00 min,液固比24.15∶1 ml/g,pH 5.95,酶量6 640 IU/g。在此条件下,产糖率为25.339 4%。[结论]研究可为油菜秸秆的综合利用提供技术支持。
  关键词关键词
  中图分类号S509.9文献标识码A文章编号0517-6611(2015)29-287-05
  油菜是我国重要的油料作物,种植面积和产量常年居于世界首位。油菜秸秆木质部分的纤维组织发达,其纤维素含量为43.6%~47.3%。目前,国内油菜秸秆的利用率极低,除了少数作为肥料、饲料、沼气、食用菌等的原料外,绝大部分没有得到有效利用,或是野外任意丢弃,或是田间焚烧,不仅浪费了宝贵的有机质资源,而且污染了环境。因此,对于利用开发油菜秸秆生产燃料乙醇的研究显得尤为重要,也是实现农作物秸秆资源化利用的有效途径。笔者以产糖率为指标,采用微波对油菜秸秆预处理工艺进行初步研究,并应用响应面分析法就预处理工艺进行优化,以期为油菜秸秆的综合利用提供技术支持。
  1材料与方法
  1.1材料
  1.1.1原料。油菜秸秆,采集于湖南农业大学耘园教学基地。纤维素酶,10 000 IU/g,由湖南鸿鹰翔生物工程有限公司提供。
  1.1.2主要仪器与药品。器材:EG720FA4NR微波炉,美的集团;FW100型高速万能粉碎机,天津泰斯特仪器有限公司;HH60型数显恒温搅拌循环水箱,常州市华普达教学仪器有限公司;TH298台式恒温振荡器,常州诺基仪器有限公司;DHG9070型电热恒温鼓风干燥箱,上海精密实验设备有限公司;PL303电子天平,上海梅特勒-托利多集团;旋转蒸发仪,上海实验仪器总厂;722型分光光度计,北京科瑞海科学仪器公司。
  药品:葡萄糖、硫酸、3,5二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、亚硫酸钠,分析纯AR,国药集团化学试剂有限公司;无水乙醇,分析纯AR,天津市恒兴化学试剂制造有限公司。
  1.2方法
  1.2.1油菜秸秆的前处理。将采集的油菜秸秆剪成2~3 cm的小段,于50 ℃烘干后,粉碎成20目左右。备用。
  1.2.2油菜秸秆的微波处理条件研究。称取10 g油菜秸秆粉置于500 ml烧杯中,分别改变微波功率(70、210、350、560、700 W)、微波处理时间(6、7、8、9、10 min)、液固比(15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1 ml/g)、溶液pH(5.0、5.5、6.0、6.5、7.0)等条件处理后,调节pH 5.0,按油菜秸秆干重加入3 000 IU/g纤维素酶,50 ℃下恒温处理24 h,测定糖含量,并计算产糖率。考察不同预处理条件对产糖率的影响,重复3次。
  1.2.3酶解条件的确定。调节上述经微波处理后的油菜秸秆粉溶液pH至5.0,分别加入不同量的纤维素酶(2 000、3 000、4 000、5 000、6 000、7 000 IU/g),于50 ℃水浴酶解不同的时间(8、16、24、32、40 h),抽滤,测定滤液的含糖量,计算其产糖率。
  1.2.4油菜秸秆糖化条件的响应面优化。根据BoxBehnken中心组合试验设计原则,基于单因素试验结果,选取微波处理时间、液固比、微波处理pH和加酶量,设计4因素3水平试验优化油菜秸秆糖化条件。各因素水平的编码表见表1。
  1.2.5分析方法。糖含量的测定参照文献提供的方法进行。试验结果采用统计软件SPSS17.0进行Duncan氏多重比较检验均值的差异显著性。
  2 结果与分析
  2.1微波功率对产糖率的影响分别称取10 g油菜秸秆粉置于500 ml烧杯中,按液固比20∶1 ml/g加入水,调节pH到5.5,采用70、210、350、560、700 W的输出功率进行微波处理后,测定处理液中糖的含量,并计算产糖率,结果见图1。
  由图1可知,随着微波处理功率增加,产糖率也随之增加,当微波处理功率为560 W时,产糖率最高,达27.13%。但加大微波功率,产糖率下降。
  2.2微波处理时间对产糖率的影响改变微波处理时间,其他条件不变,分别探讨不同的微波处理时间对产糖率的影响,结果见图2。
  从图2可以看出,当微波处理时间为7 min时,产糖率达29.26%。但随着处理时间延长,产糖率下降,原因为处理时间过长微波加热会使溶液温度过高,导致纤维素分子间发生部分团聚,反而聚合度增加,糖化速度变慢。
  2.3液固比对产糖率的影响分别改变液固比为15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1 ml/g,其他条件不变,考察不同液固比对产糖率的影响,结果见图3。
  由图3可见,随着液固比的增加,产糖率增加,当液固比为25∶1 ml/g时,产糖率为22.15%。但当液固比超过25∶1 ml/g时,随液固比的增加产糖率缓慢降低。原因是提高液固比,有利于分散物料,使物料能充分受到微波处理,充分与酶接触。但液固比过高时,水量增加,微波效率降低,同时底物浓度降低,酶解效率也降低,从而导致产糖率降低。
  2.4微波处理pH对产糖率的影响用稀酸或稀碱调节油菜秸秆液pH为5.0、5.5、6.0、6.5、7.0,其他条件不变,探讨不同的pH条件下对微波预处理油菜秸秆产糖率的影响,结果见图4。   酸性条件下有利于纤维素晶体结构的破坏,降低纤维素的结晶度,从而有利于纤维素的水解,但pH过低时半纤维素结构破坏产生抑制物。由图4可见,随着pH的提高,产糖率增加。当pH为6.0时,产糖率为23.23%;但当pH超过6.0时,产糖率下降。
  2.5纤维素酶酶量对产糖率影响在得到适宜预处理条件的基础上,按油菜秸秆干重分别加入2 000、3 000、4 000、5 000、6 000、7 000 IU/g的纤维素酶,其他条件不变,探讨纤维素酶量对产糖率的影响,结果见图5。
  由图5可知,随着酶量的增加,产糖率显著增加,当酶量达到6 000 IU/g时,产糖率为30.43%。但当酶量超过6 000 IU/g时,产糖率增长不明显。
  2.6酶解时间对产糖率的影响将油菜秸秆处理液加酶后,置于50 ℃条件下恒温处理8 h开始第1次取样,以后每隔8 h取样一次,测定处理液中糖含量,并计算产糖率,考察酶解时间对产糖率的影响,结果见图6。
  由图6可以看出,随着酶解时间的延长,产糖率上升。当酶解时间达到32 h时,产糖率为29.61%。但当酶解时间超过32 h,产糖率略有下降。原因为酶解产物积累到一定浓度,会产生反馈抑制,而且处理时间长,微生物大量生长而消耗部分糖进而导致酶解液中糖的下降。
  2.7响应面处理条件优化
  2.7.1响应面试验设计及结果。参照文献进行4因素3水平的试验分析,共27个试验点,其中24个为分析因子,3个为零点,零点试验重复3次,以估计误差。以产糖率(R1)为响应值,试验设计及结果见表2。
  2.7.2产糖率的方差分析。根据表2试验结果,采用DesignExpert 8.0.5b软件对试验结果进行二次多项回归拟合获得以产糖率为响应值的回归方程:R1=24.43+0.41A-0.19B-0.24C+1.82D+0.087AB-0.56AC-0.37AD-0.59BC-0.11BD-0.44CD-1.10A2-0.85B2-1.48C2-0.51D2。
  响应面结果方差分析显示:F模型=64.30,P模型<0000 1**;FA=30.16,PA<0.000 1**;FB=6.26,PB=0.027 8;FC=10.10,PC=0.008 0**;FD=583.20,PD<0.000 1**;FAB=0.45,PAB=0.514 8;FAC=18.79,PAC=0.001 0**;FAD=7.95,PAD=0.015 5;FBC=20.49,PBC=0.000 7**;FBD=0.68,PBD=0.425 6;FCD=1126,PCD=0.005 7**;FA2=94.51,PA2<0.000 1**;FB2=57.03,PB2<0.000 1**;FC2=171.58,PC2<0.000 1**;FD2=20.51,PD2=0.000 7;F失拟=0.83,P失拟=0.661 5。由此可知,A、C、D、AC、BC、CD、A2、B2、C2对产糖率的影响极显著(P<0.01),说明微波处理时间、pH和酶量是纤维素糖化处理过程中的重要因素,表明回归方程的一次项、交互项和二次项的影响都是高度显著的。该模型回归显著(P<0.000 1),且失拟项不显著(P>0.05),说明数据中没有异常点,模型适当,回归方程拟合度良好。
  采用DesignExpert 8.0.5b软件分析模型的可信度,结果见表3。由表3可见,回归方程的复相关系数为0.986 8,表明98.68%的产糖率变化可由此模型解释,与实际试验拟合较好;校正相关系数为0.971 5,预测相关系数为0.933 2,两者极为相近,说明其他因素的干扰较少。产糖率变异系数为1.15%,信噪比为25.508,说明该模型的可信度高。因此,可以用上述模型代替真实试验点对纤维素的糖化处理进行分析和预测。
  2.7.3产糖率的响应曲面分析。响应面分析的图形是特定的响应值对应自变量构成的一个三维空间图,可以直观地反映出各自变量对响应值的影响[12]。采用DesignExpert 8.0.5b软件对产糖率的回归模型进行分析,微波处理时间、液固比、微波处理pH和酶量4个因素交互影响产糖率的响应面图和等高线图见图7~12。
  从图7~12可知,微波处理时间和液固比、微波处理时间和pH、液固比与pH对产糖率的交互作用显著,而微波处理时间和酶量、液固比和酶量、微波处理pH和酶量对产糖率的交互作用不显著。
  2.7.4显著因素水平优化。由图7~12给出的回归方程的三维响应面及等高线图可知,回归模型存在稳定度,即最大值。并对产糖率的回归方程分别求一阶偏导等于零,得到模型的最佳因素编码为:A=-0.121 4,B=0.216 3,C=-0.067 3,D=1.880 7,将其代入产糖率回归方程,得到预测糖产率为26.167 8%。各编码所对应的A、B、C、D的实际取值为:微波处理时间为7.00 min,液固比为24.15∶1 ml/g,pH为5.95,酶量为6 640 IU/g。
  2.7.5验证试验。按照优化试验所得的各因素优化值,即微波处理时间为7.00 min,液固比为24.15∶1 ml/g,pH为5.95,酶量为6 640 IU/g进行验证试验,重复3次,产糖率依次为25.924 2%、25.336 8%、25.387 2%,平均产糖率为25.339 4%,与理论预测值25.428 3%的相对误差为0.35%,可见该模型能较好地预测油菜秸秆纤维素糖化的工艺条件。
  3结论与讨论
  由于农作物秸秆中纤维素分子形成结构紧密的晶状结构,且被难以分解的木质素缠绕包围,使得纤维素酶对其可及性差,酶解糖化用酶量大且作用时间长、效率低、成本高[13-14]。因此,酶水解之前的预处理是秸秆纤维素转化为可发酵糖的关键技术[15-16]。预处理技术主要有物理处理、化学处理和生物处理法。伦晓中等应用膨化技术对玉米秸秆进行预处理,在温度48 ℃,pH 4.5,液固比8∶1 ml/g,酶浓度36.0 U/g,酶解时间25 h的条件下,还原糖的转化率为28.98%[17]。张木明等采用酸处理、碱处理和机械粉碎法对稻草秸秆进行预处理后,酶解产糖率分别为9.25%, 33.16%和10.64%[18]。吴国杰等以稻草秸杆为原料,经2%氢氧化钠预处理后,获得糖化率达40%的结果[19]。该研究在利用响应面法得到油菜秸秆纤维素转化生物乙醇的最优条件为:微波处理功率560 W,微波处理7.00 min,液固比24.15∶1 ml/g,pH 5.95,酶量6 640 IU/g,在此条件下的理论产糖率为25.428 3%。通过验证试验,测得平均产糖率为25.339 4%,与理论预测值相比,相对误差为0.35%,说明该模型能较好地预测分析油菜秸秆纤维素微波预处理糖化的实际情况,可为油菜秸秆的综合利用提供技术支持。   参考文献
  [1] 鞠兴荣,王立峰,袁建,等.双低菜籽粕分离蛋白提取效果优化研究[J].中国粮油学报,2005,20(6):101-105.
  [2] 宋新南,房仁军,王新忠,等.油菜秸秆资源化利用技术研究[J].自然资源学报,2009,24(6):984-989.
  [3] 兰时乐,曹杏芝,戴小阳,等.鸡粪与油菜秸秆高温堆肥中营养元素变化的研究[J].农业环境科学学报,2009,28(3):564-569.
  [4] 乌兰,马伟杰,义如格勒图,等.油菜秸秆饲用价值分析及其开发利用[J].畜牧与饲料科学,2012,31(6/7):421-422.
  [5] 万楚筠,黄凤洪,刘睿,等.微生物预处理油菜秸秆对提高沼气产量的影响[J].农业工程学报,2010,26(6):267-271.
  [6] 姚升好,卢伟,陶鸿.利用油菜秸秆栽培白金针菇关键技术的研究[J].安徽农业科学,2007,35(27):8479,8481.
  [7] 董先茹,叶翔,梁昌柱,等.氮离子束诱变蟹味菇菌株的营养价值及油菜秸秆栽培研究[J].食品工业科技,2013,34(13):132-135.
  [8] 杨大进,常笛,赵馨,等.食品中还原糖的测定:BG/T5009.7-2008[S].北京:中国标准出版社,2009.
  [9] 刘振,郝静静,代辉,等.纤维素在微波场下经离子液体预处理酶解糖化[J].微波学报,2011,27(3):93-96.
  [10] 方志锋,刘昆仑.木质纤维素类生物制备生物乙醇研究进展[J].现代化工,2013,33(1):30-32.
  [11] 兰时乐,毛小伟,肖调义,等.菜籽粕混合菌固体发酵脱毒条件的响应面优化研究[J].动物营养学报,2013,25(3):617-627.
  [12] 蒋剑平,许海顺.响应面分析法优化白花蛇舌草水溶性多糖的提取工艺[J]. 浙江中医药大学学报,2012,36(2):187-191.
  [13] HENDRIKS A T W M,ZEEMAN G.Pretreatments to enhance the digestibility of lignocellulosic iomass[J].Bioresource technology,2009,100(1):10-18.
  [14] 张建安,张小勇,韩润林,等.木素对纤维素酶解的影响及纤维素酶解[J].化学工程,2000,28(1):38-39,43.
  [15] SUN Y,CHENG J Y.Hydrolysis of lignocellulosic materials for ethanol production:A review[J].Bioresource technology,2002,83(1):1-11.
  [16] YU J,ZHANG J B,HE J,et al.Combinations of mild physical or chemical pretreatment with biological pretreatment for enzymatic hydrolysis of rice hull [J].Bioresource technology,2009,100(13):903-908.
  [17] 伦晓中,寇巍,赵勇,等.膨化预处理玉米秸秆的还原糖酶解工艺[J].环境工程学报,2013,7(1):317-322.
  [18] 张木明,徐振林,张兴秀,等.预处理对稻草秸秆纤维素酶解产糖及纤维素木质素含量的影响[J].农产品加工(学刊),2006(3):4-6.
  [19] 吴国杰,柳菲,陈嘉恒,等.稻草纤维素水解机理及工艺条件的研究[J].广东化工,2012,39(10):12-14.
其他文献
摘要对长乐口岸2014年进境粮谷疫情截获进行统计分析。结果表明,进境粮谷携带大量外来有害生物,截获的有害生物以杂草为主;不同种类和不同来源国的进境粮谷中截获的主要有害生物存在明显差异,从大豆中截获有害生物种类数最多,油菜籽相对偏少。分析结果还明确了截获频率较高的检疫性有害生物种类,为后续检疫措施的制定提供了依据。同时,分析认为应通过检验检疫、全程监督管理、检疫除害处理和本底调查与疫情监测4个方面加
期刊
摘要通过模拟试验, 研究了4种不同比例的基质(沙土∶黄土∶淤泥=1∶1∶8,沙土∶黄土∶淤泥=1∶1∶3,沙土∶黄土∶淤泥=1∶1∶1,沙土∶黄土∶淤泥=5∶1∶1)对穗花狐尾藻、轮叶黑藻生长的影响。结果表明,生长在4种不同比例基质下的穗花狐尾藻和轮叶黑藻,其最终生物量、最大株高及分蘖数以沙土∶黄土∶淤泥=1∶1∶8基质条件下最佳,生长状况以相对贫瘠的沙土∶黄土∶淤泥=5∶1∶1基质条件下最差。叶
期刊
摘要通过实地调查滇西北16个县的栒子属植物和查阅大量标本及相关文献,对滇西北栒子属植物的地理分布特征及开发与利用价值进行分析。结果表明,滇西北栒子属植物资源极为丰富,滇西北分布的栒子属植物有33个种和9个变种,其中新记种1个种,1个种和7个变种为云南特有种,15个种和1个变种为滇西北特有的分布种类。栒子属植物在滇西北广泛分布,从低海拔到高海拔均有分布,从总体水平看,草本类分布种类少,栒子属植物在温
期刊
摘要[目的]检测葛根植物饮料加工过程中葛根素及总黄酮的含量。[方法] 在现有的葛根饮料生产工艺基础上,分别采用HPLC法和UV法对加工过程中葛根素及总黄酮含量变化趋势进行了对比分析。[结果]试验表明,葛根饮料生产过程中葛根素及总黄酮含量变化趋势基本一致,在提取1.5 h时达到最高峰,分别为0.16 mg/ml和0.34 mg/ml,在后续的工艺生产过程中,葛根素及总黄酮含量虽略有变化,但总体趋势平
期刊
摘要基于有关广东省围填海对近海生态环境影响的文献资料,综述了广东省围填海与海岸线变化的关系,围填海对滩涂和红树林等海岸湿地生态系统的影响,以及近海海洋生物对广东围填海的响应。最后指出了广东省围填海生态影响研究中存在的薄弱环节,并对其未来发展方向进行了展望。  关键词围填海;近海生态环境;滩涂;海岸线;广东省  中图分类号S181.3文献标识码A文章编号0517-6611(2015)29-245-0
期刊
摘要在实地野外考察、标本鉴定及查阅大量文献资料的基础上,运用植物地理区系研究法,对西天山豆科植物进行了系统的分析,并紧接着探讨了豆科植物多样性对生态旅游的影响。分析结果:①新疆西天山共有44属、349种豆科植物,其占西天山总植物种类的15.42%,生活型以中生植物为主,生态型以高位芽植物为主。②本区的豆科植物区系成分相对复杂,具有较强的温带性质,含有238个温带性种,占总种数的68.19%,其中北
期刊
摘要在总结国内外关于灾害风险研究的基础上,以滇东北地区为案例,通过分析农业低温冷害自然致灾风险值和承灾体易损度指数,构建滇东北地区农业低温冷害综合风险度评价模型。对农业低温冷害综合风险度进行分级,并利用GIS技术绘制滇东北地区农业低温冷害综合风险区划图;最后,借用交通网络结构的测量参数对自然致灾风险区、易损度等级区及综合风险区进行空间结构分析,且对低温冷害系统内部一些要素进行关联性分析。结果表明,
期刊
摘要为研究土地出让对公共服务支出的影响,选取公共服务支出中的教育支出为评价指标,提出假设:“土地出让对教育支出有正影响”。利用软件Stata13.1对我国31个省份有关土地出让和教育支出的12年的面板数据进行计量分析,推翻假设,得出土地出让对教育支出有负影响。并对这一结论进行尝试性解释,提出相应的政策建议:完善政绩考核制度,改革户籍制度,完善土地收支管理制度,完善分税制。  关键词土地出让;教育支
期刊
摘要由于农田温度信息在离散余弦基(DCT)下的近似稀疏性,采用压缩感知(CS)技术对每块农田温度信息进行压缩和重构,即将温度信息投影到随机高斯观测矩阵,在接收端通过OMP算法重构出每块农田的温度信息。仿真试验结果表明,在较为稳定的网络环境中,CS算法能够以较少的观测值实现对原始信号的精确重建,降低节点能耗,延长网络生命周期。  关键词压缩感知;离散余弦变换;正交匹配追踪算法;农田温度  中图分类号
期刊
摘要[目的] 研究云南片烟感官质量与香味成分的关联关系,改善片烟质量。[方法] 以云南片烟为研究对象,采用灰色关联分析方法,分别以不同类别致香成分、具体香味成分为出发点,探索影响片烟香气质量的主要因素。 [结果] 分析表明,8种致香成分中与香气质、香气量和评吸总分关联程度最高的为醛类、氮杂环类和酮类,其中醛类物质己醛、糠醛和5,5二甲基3氧基1环己烯1甲醛与香气质、香气量和评吸总分的关联程度最高并
期刊