探讨Sestrin2过表达在大鼠海马神经元缺氧复氧损伤中的保护作用及其机制。
方法将从出生24 h内的SD大鼠中提取并体外培养的原代海马神经元以2×104个/mL的密度接种到6孔板后，分为对照组、缺氧复氧组、空载体组、Sestrin2过表达组，后3组采用氧糖剥夺法制备成缺氧复氧模型，后2组于缺氧复氧处理前分别转染含空载体及Sestrin2过表达基因的慢病毒。缺氧6 h复氧20 h后采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测各组海马神经元中ROS含量；采用ATP检测试剂盒检测ATP浓度；采用流式细胞术检测细胞凋亡率；采用Western blotting检测Sestrin2、动力相关蛋白1(Drp1)、Fis1、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)的蛋白表达，并计算Bcl-2/Bax蛋白比值；采用透射电镜观察线粒体的超微结构。
结果与对照组相比，缺氧复氧组海马神经元中ATP浓度、Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax蛋白比值明显降低[(11.15±0.42) nmol/mg蛋白vs. (5.30±0.39) nmol/mg蛋白；2.20±0.26 vs. 0.91±0.02；6.46±0.41 vs. 1.04±0.05]，ROS平均荧光强度、细胞凋亡率及Sestrin2、Drp1、Fis1、Bax、Cyt C蛋白表达明显增高(152.41±17.38 vs. 1530.00±14.69；3.77%±0.74% vs. 56.57%±1.35%；0.66±0.06 vs. 1.11±0.20；0.48±0.03 vs. 1.16±0.07；1.14±0.09 vs. 2.47±0.09；0.34±0.03 vs. 0.88±0.04；0.17±0.03 vs. 0.30±0.03)，差异均有统计学意义(P<0.05)，且线粒体的完整性明显破坏。与缺氧复氧组相比，Sestrin2过表达组海马神经元中ATP浓度及Sestrin2、Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax蛋白比值明显增高[(5.30±0.39) nmol/mg vs. (8.95±0.27) nmol/mg；1.11±0.20 vs. 2.67±0.07；0.91±0.02 vs. 1.80±0.19；1.04±0.05 vs. 3.95±0.28]，ROS平均荧光强度、细胞凋亡率及Drp1、Fis1、Bax、Cyt C蛋白表达明显降低(1530.00±14.69 vs. 337.27±15.32；56.57%±1.35% vs. 10.33%±2.60%；1.16±0.07 vs. 0.43±0.02；2.47±0.09 vs. 1.11±0.08；0.88±0.04 vs. 0.45±0.02；0.30±0.03 vs. 0.17±0.02)，差异均有统计学意义(P<0.05)，且线粒体的结构相对完整。
结论Sestrin2过表达能够通过抑制线粒体分裂、减少ROS蓄积、改善线粒体能量代谢、阻断线粒体介导的细胞凋亡，从而减轻大鼠海马神经元缺氧复氧损伤。