【摘 要】
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甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫体内甾醇吸收及运输过程中有着重要的生理功能。试验构建重组表达质粒pET-22b/HaSCP2,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,并对IPTG浓度、诱导时间及
【机 构】
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湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31401807);湖北工业大学高层次人才科研启动项目(BSQD13002);湖北工业大学大学生创新创业项目(201510500064)
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甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫体内甾醇吸收及运输过程中有着重要的生理功能。试验构建重组表达质粒pET-22b/HaSCP2,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,并对IPTG浓度、诱导时间及温度进行优化,经Ni柱分离纯化后分析其与胆固醇结合活性。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白相对分子质量约为16 ku,且在25℃,IPTG终浓度0.2 mmol·L~(-1)下诱导10 h为最佳诱导表达条件。经荧光探针8-苯胺-1-萘磺酸(1,8-ANS)竞争分析,胆固醇与HaSCP-2结合
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