锦带花ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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以锦带花幼叶为试材,提取锦带花基因组的DNA,并对其纯度、浓度进行检测,建立适合锦带花的ISSR-RCR反应体系。结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要。同时对锦带花ISSR-PCR反应体系中各个影响因素进行优化,建立了适合锦带花ISSR分子标记的最佳反应体系,即在20μL的反应体系中,含稀释浓度为3倍的DNA模板,0.20mmol/LdNTP,稀释10倍体积高保真PCR缓冲液含(Mg2+)3.0uL;1.00umol/L引物,1.25UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5min;94℃
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