【摘 要】
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对耶氏酵母（Yarrowiaz lipozztica）中编码与γ-癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因（POX1-POX5）中的POX3基因用Cre／loxP同源重组系统进行敲除。设计含有60个核苷酸与POX3基因的OR
【机 构】
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天津科技大学食品工程与生物技术学院,哈尔滨工业大学（威海）科学与工业技术研究院
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对耶氏酵母（Yarrowiaz lipozztica）中编码与γ-癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因（POX1-POX5）中的POX3基因用Cre／loxP同源重组系统进行敲除。设计含有60个核苷酸与POX3基因的ORF两侧序列同源的长引物，以pUG6为模板构建带有loxP—KanMX—loxP系统的敲除组件，之后转化耶氏酵母，通过PCR确定阳性克隆子。将质粒pSH65转入阳性克隆子，半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因。最后在YPD培养基中传代丢失pSH65质粒，获得POX3缺陷型菌株。由于在解
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