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目的改进RP-HPLC法测定牛黄及安宫牛黄丸中的游离胆红素以保证牛黄类药材及安宫牛黄丸的质量与用药安全。方法以二氯甲烷为溶剂提取样品,HPLC法测定游离胆红素的量。对于安宫牛黄丸,分别考察碳酸钙、硅藻土等不同分散介质对游离胆红素测定的影响。色谱条件为Kromasil 100C18色谱柱(5μm,0.46 cm×15cm),以乙腈-1%冰醋酸(95∶5)为流动相,检测波长为450 nm。结果胆红素在0.305 5~30.55μg/mL范围内线性良好,加样回收率在95%~105%之间。对于安宫牛黄丸,采用碳酸钙作为分散介质的测定结果优于硅藻土等介质。结论采用碳酸钙替代硅藻土作为牛黄类药材及其大蜜丸样品中游离胆红素分析的分散介质,方法准确度高,操作简便易行。