【摘 要】
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目的 研究龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响并探讨相关机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;4,6-二脒基-2-苯基吲
【机 构】
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嘉兴学院医学院,浙江嘉兴314001
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目的 研究龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响并探讨相关机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色荧光显微镜进行细胞凋亡核形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光显微镜结合Fluo-8/Am法、流式细胞术和分光光度比色法分别检测胞内Ca2+浓度、线粒体膜电位(△Ψm)和caspase-3,caspase-8活性变化.结果 四甲基偶氮唑蓝法结果显示,龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制作用.10.0 mmol.L-1龙葵碱处理2d,4,6-二眯基-2-苯基吲哚染色可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带.10.0 mmol.L-1龙葵碱处理1,2,3d的细胞凋亡率分别为(20.9±7.3)％、(42.6±8.8)％和(74.9±12.8)％;细胞内Ca2+荧光强度分别为35.6±2.9、52.3±5.6和27.2±2.2;线粒体膜电位(△Ψm)值分剐下降7.7％、33.2％和46.9％;caspase-8活性在ld达最高(1.85±0.09)U·μg-1,caspase-3活性则在2d达最高(2.18±0.09)U·μg-1,与对照组相比均有统计学显著性差异(P＜0.05).结论 龙葵碱可诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与胞内Ca2+浓度升高、线粒体膜电位降低和caspase-3、8活化有关.
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