【摘 要】
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目的:建立重组人胰岛素原料药N末端氨基酸序列的测定方法。方法:基于Edman降解原理,重组人胰岛素原料药样品经1%乙酸溶液处理,采用PPSQ-53A蛋白质测序仪依序切割N末端氨基酸
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目的:建立重组人胰岛素原料药N末端氨基酸序列的测定方法。方法:基于Edman降解原理,重组人胰岛素原料药样品经1%乙酸溶液处理,采用PPSQ-53A蛋白质测序仪依序切割N末端氨基酸后,注入高效液相色谱仪,使用Wakopak Wakosil PTH-GR硅胶柱,通过梯度洗脱分离,流速为0.3 ml/min,柱温为35℃,进样体积为50μl,PDA检测器分析波长为269 nm。同时,采用PPSQ-53A蛋白测序仪进行等度洗脱分析N末端序列。结果:重组人胰岛素原料药N末端氨基酸理论序列:A链为Gly-Ile-V
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