观察微小RNA(miRNA,miR)-23靶向调控SRY相关高迁移率族盒蛋白-5(SOX5)的表达及其对脑垂体腺瘤细胞增殖的影响。
方法将miR-23 mimic及阴性对照(NC)采用Lipofectamine脂质体法转染至脑垂体腺瘤细胞,并记为miR-23 mimic组和NC组,以未转染的脑垂体腺瘤细胞作为对照组。转染后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测各组细胞miR-23和SOX5 mRNA的表达量,Western blot检测各组细胞SOX5的蛋白水平,噻唑蓝(MTT)法检测的各组细胞增殖活性,采用荧光素酶报告实验检测miR-23对SOX5的靶向调控作用,过表达SOX5与miR-23 mimic共转染后检测细胞增殖活性。
结果FQ-PCR检测结果显示,转染48 h后miR-23 mimic组的miR-23的表达水平(0.54±0.13)低于对照组(1.00,P=0.001)和NC组(1.03±0.09,P=0.000),差异有统计学意义;miR-23 mimic组增殖活性与其余两组比较,转染24、48、72、96 h后的脑垂体腺瘤细胞的增殖能力均降低(A24 h=0.47±0.04,A48 h=0.52±0.05,A72 h=0.54±0.05,A96 h=0.55±0.06,与对照组比较,P1=0.036,P2=0.019,P3=0.006,P4=0.000)。荧光素酶报告基因实验表明miR-23可靶定结合SOX5 mRNA 3’端非编码区(3’UTR)。PcDNA-SOX5与miR-23 mimic共转染后,经细胞增殖检测显示,过表达SOX5可抵抗miR-23 mimic引起的细胞增殖抑制作用。
结论miR-23可靶向下调SOX5的表达显著抑制脑垂体腺瘤细胞的增殖。