【摘 要】
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通过RT-RCR的方法从高山被孢霉W15菌株中扩增到完整的Δ5去饱和酶基因,其全长为1341bp,编码446个氨基酸。对推导的氨基酸序列进行分析表明,其N末端存在细胞色素b5结构域,在序
【机 构】
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华中科技大学生命科学与技术学院,河南理工大学资源环境学院
【基金项目】
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教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET110172）, 国家自然科学基金青年科学基金项目（41202113）, 河南理工大学博士基金项目（B2011-035）
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通过RT-RCR的方法从高山被孢霉W15菌株中扩增到完整的Δ5去饱和酶基因,其全长为1341bp,编码446个氨基酸。对推导的氨基酸序列进行分析表明,其N末端存在细胞色素b5结构域,在序列中还存在3个保守的组氨酸富集区。将该基因连接到表达载体pPIC3.5K上,转化毕赤酵母细胞,利用G418筛选高拷贝数的转化子。以双高γ-亚麻酸为底物,在甲醇诱导的条件下,Δ5去饱和酶可催化底物脱氢生成花生四烯酸,其含量占总脂肪酸含量的2.85%。说明克隆的Δ5去饱和酶基因能在毕赤酵母中进行功能性的表达。
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