【摘 要】
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目的:探讨嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)结构对CAR-NK细胞特异性杀伤能力的增强情况.方法:利用逆转录病毒载体分别构建出稳定表达靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)与分化群抗原19(cluster of differentiation 19,CD19)CAR的CAR-NK92MI细胞,随后使用流式细胞术检测经MYC-PE抗体染色的CAR-NK细胞的CAR阳性率.采用荧光素酶检测法、IncuCyte实时动态细胞成像分
【机 构】
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北京中医药大学生命科学学院,北京 102488
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目的:探讨嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)结构对CAR-NK细胞特异性杀伤能力的增强情况.方法:利用逆转录病毒载体分别构建出稳定表达靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)与分化群抗原19(cluster of differentiation 19,CD19)CAR的CAR-NK92MI细胞,随后使用流式细胞术检测经MYC-PE抗体染色的CAR-NK细胞的CAR阳性率.采用荧光素酶检测法、IncuCyte实时动态细胞成像分析系统、流式细胞术检测两种CAR-NK92MI细胞与只表达CD19或者只表达BCMA的肿瘤细胞共孵育一定时间后肿瘤细胞的凋亡情况.结果:成功构建出稳定高表达CAR的ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞系和ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞系.体外杀伤实验结果显示,相比表达BCMA的肿瘤细胞,ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞对表达CD19的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性;而相比表达CD19的肿瘤细胞,ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞对表达BCMA的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性.结论:CAR结构可以显著增强CAR-NK细胞的特异性杀伤能力.
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