弹性蛋白酶肺气肿表面活性物质蛋白A、B的基因表达

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目的研究肺气肿发生、发展过程中表面活性物质蛋白A、B(SP-A、B)的基因表达变化.方法金黄地鼠气道一次性注入弹性蛋白酶,分别于注酶后的7、14、21、30、60和90天处死.动物右肺组织福尔马林灌注固定后,石蜡包埋、切片,分别行HE和抗SP-A、B的免疫组化染色,并进行显微-微机形态定量.左肺液氮冷冻后,保存于-70℃,异硫氰酸胍一步法提取总RNA,甲醛变性胶电泳,转移至尼龙膜.扩增、酶切质粒,并回收、32p标记SP-A、B DNA片断.最后,行Northern Blot,放射自显影后,测定光密度.结果 1.免疫组化显示:注酶7~30天SP-A、B阳性细胞百分率逐步降低,其中,30天SP-A、B阳性细胞百分率与正常组有明显差异(P<0.01),由30~90天SP-A、B阳性细胞百分率明显回升,但仍低于正常组.2.Northern Blot结果:注酶30天SP-A和B mRNA量明显低于正常组,但是,到达90天后SP-A、B mRNA量基本与正常组无明显差异.结论肺气肿发病过程中SP-A、B基因表达的动态变化提示,表面活性物质蛋白A、B变化可能参与肺气肿的发生和发展.
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