稳定转染ABCG2 shRNA真核沉默载体的人喉癌Hep-2细胞的建立及其SP检测

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目的构建ABCG2 shRNA稳定转染人喉癌Hep-2细胞株探讨ABCG2基因表达与Hep-2细胞中SP(侧群细胞)比例的关系。方法 (1)利用脂质体法转染ABCG2 shRNA真核沉默载体,嘌呤霉素筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染shRNA真核沉默载体的Hep-2细胞系,用RT-PCR、Western-blot及免疫荧光法检测转染效率及ABCG2沉默效果。(2)Hep-2及Hep-2-shABCG2稳转细胞经Hoechest33342以及维拉帕米和PI染色后,流式细胞仪检测转染后各组细胞中SP比例的变
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