猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pretter

【摘要】

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以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因.经测序证实后插入载体pJLA-503,并实现在大肠杆菌中的高表达.表达产物以包涵体形式存在,经7

【作者】

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郭瀛军吴丹陈蕊雯孙树汉

【机构】

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第二军医大学医学遗传学教研室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2001年2期

【关键词】

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Γ干扰素基因表达分离纯化大肠杆菌 interferon|γ gene expression isolation and purification

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)

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以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因.经测序证实后插入载体pJLA-503,并实现在大肠杆菌中的高表达.表达产物以包涵体形式存在,经7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性.再经DEAE-Sepharose离子交换柱、Sephdex-200凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN-γ蛋白,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性.

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