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采用SMART(switching mechanism at 5’end of RNA transcript)技术构建了黑斑蛙(Rana nigromaculata)精巢组织全长cDNA文库。一步法提取成体蛙精巢组织总RNA,用Powerscript^TM反转录酶逆转录合成第一链cDNA;再用LD-PCR合成双链cDNA;经过SfiⅠ酶切和Chroma spin-400柱分离后,500bp以上的片段与λTriplEx2载体连接,再用GigapackⅢ Gold Packaging Extract包装蛋白包