目的建立LC-MS/MS法检测新型药物过敏反应介质血小板活化因子C-18(PAF C-18)及其乙酰水解酶(PAF-AH)活性的方法。方法在空白血浆中添加血小板活化因子C-18标准品,用甲醇、氯仿及超纯水进行提取,取出下层,氮气吹干复溶后进样。色谱柱为Agilent XDB C18,有机相为含有1mmol·L-1醋酸铵的甲醇,水相为甲醇-乙腈-水=57∶20∶23(含有1 mmol·L-1醋酸铵),进行梯度洗脱。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、基质效应及稳定性。结果样品在19 min出峰,内标Lyso PAF C-16-d4在7 min出峰。PAF C-18在0.5~25.0 ng·m L-1线性关系良好(r=0.998 4)。日内及日间精密度RSD均在10%以下。回收率在67.0%~82.1%,基质效应在115.3%~116.9%,于室温放置90 min即完全代谢,说明样本需立即处理。结论本方法是一种简单、快速、特异、稳定地测定人血浆中PAF C-18的方法,并可以通过外源性添加PAF C-18在一定时间内的下降程度,间接反映PAF-AH活性,便于开展药物过敏的临床药学研究。