研究PM2.5对人胚胎干细胞来源的成纤维细胞(EBf-H9细胞)的氧化损伤情况。
方法采用0.00、3.91、7.81、15.63、31.25、62.50、125.00 μg/cm2的PM2.5作用于EBf-H9细胞,以0.00 μg/cm2剂量组为对照组,采用CCK-8试剂盒检测PM2.5染毒6 h的细胞存活率;采用DCFH-DA探针检测染毒1 h细胞内活性氧(ROS)水平;采用试剂盒检测染毒6 h细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。使用单因素方差分析不同染毒组各指标的统计学差异。
结果细胞毒性试验结果显示,随着PM2.5染毒浓度的增加,细胞存活率逐渐降低,其半数抑制浓度(IC50)为83.01 μg/cm2。3.91、7.81、15.63、31.25、62.5 μg/cm2剂量组在染毒1 h后,细胞内ROS荧光强度分别为54.03±0.50、60.93±0.08、61.36±1.00、68.21±0.93、78.27±1.26,与染毒剂量为0.0 μg/cm2的对照组(27.12±0.21)相比,P值均<0.01;染毒6 h T-SOD活性分别为(9.78±0.28)、(8.59±0.22)、(8.90±0.33)、(7.46±0.71)、(4.21±0.17)U/mg蛋白,与对照组[(11.77±0.63)U/mg蛋白]相比,P值均<0.01;GSH-Px活性分别为(181.59±3.65)、(153.33±1.69)、(168.74±2.22)、(81.56±0.56)、(48.62±2.13)mU/mg蛋白,与对照组(273.90±6.50)mU/mg蛋白相比,P值均<0.01;MDA浓度分别为(0.38±0.03)、(0.43±0.09)、(0.47±0.09)、(0.65±0.10)、(0.70±0.12)nmol/mg蛋白,与对照组[(0.27±0.02)nmol/mg蛋白]相比,P值均<0.05。
结论PM2.5能降低EBf-H9细胞存活率,导致细胞脂质过氧化水平升高,原因可能是PM2.5通过刺激细胞产生大量ROS,使细胞出现氧化应激状态,从而造成细胞的氧化损伤。