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摘 要:胶体金免疫层析技术是一种将胶体金作为示踪标志物,在抗原抗体中得到了广泛应用的新型免疫标记技术。胶体金免疫层析技术凭借着自身快速、简便的优点已经在食品检测、临床、环境污染等定性或半定性的快速免疫检测中得到了大力的运用。本文首先对胶体金免疫层析技术进行了简要探讨,并重点对胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用进行了分析。
关键词:胶体金免疫层析技术;食品检测;应用情况
食品问题一直都是社会的焦点问题,直接关系到人们生活的质量,为了保障食品的安全,针对食品安全的分析检测技术也得到了不断的开发与应用,胶体金免疫层析技术便是其中的代表之一。本文就是关于胶体金免疫层析技术在食品检测中应用情况的分析。
一、胶体金免疫层析技术的分析
胶体金是一种氯金酸的水溶液,在柠檬酸三钠、白磷等还原剂的作用下,氯金酸聚合成大小特定的金颗粒,再在静电的作用下形成一种稳定的胶体溶液。胶体金颗粒本身就具有高电子密度的特点,当其颗粒的聚集到达某一特定密度时,就会产生能够通过肉眼看见的粉红色斑点,这就是可以将其作为免疫层析试验指示物的原因[1]。不同的还原剂可以制作不同的胶体颗粒,并在食物检测中发挥出显著的效果。
二、胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用分析
胶体金免疫层析技术在医学领域中应用的是最多的,在食品检测行业中的应用是在近年来才出现的。从目前来看,胶体金免疫层析技术在食品检测行业中的应用主要是在食品质量控制领域与食品安全检测领域这两大领域中得到了大力的应用。
(一)胶体金免疫层析技术在食品质量控制领域中的应用分析
水分、脂肪、糖类、蛋白质、维生素、矿物质等是食品的主要成分,其中大部分成分都是有机高分子物质,可以使用免疫学方法对其进行检测。对于一些需要快速得到检测结果而不需要进行精确定量检测的成分分析而言,胶体金免疫层析技术是使用起来最为合理的一项技术,这类检测一般都只用进行半定量分析[2]。
例如通过SMZ—HAS免疫新西兰白兔制得抗体,选择胶体金来标记,包被在结合垫上。利用SMZ—OVA固相化在检测带之上,试纸条不存在质控带,样品中的SMA和SMZ—OVA竞争结合抗体,这种方法对于SMZ标准溶液的灵敏度可以超过50mg/ml,整个检测反应都是在10min内完成。
由于我国胶体金免疫层析技术在食品行业中的应用起步较晚,针对这一方面的研究暂时还比较缺乏,目前只涉及了保健食品的检测。比如对于牛初乳来说,其作为一种含有大量非营养性功能组分的物质,保健价值极高。但是在初乳中,IgG的含量与这些生物活性物质含量有着非常紧密的关系,并且还是一种正相关的关系。因此,在对牛初乳或者与牛初乳相关的制品的生物活性指标进行评价的时候,主要就是对其中的IgG含量进行检测[3]。
(二)胶体金免疫层析技术在食品安全检测领域中的应用分析
为了获得更多的经济利润,在食品行业中有一些不法商家通过不正当甚至违法的手段来生产与加工食品,使得食品安全问题愈来愈严重。胶体金免疫层析技术在操作起来十分简便,检测用时短,在现场进行操作的时候非常方便,能够为食品安全问题的现场执法带来很多科学依据。
1、胶体金免疫层析技术在食品有害微生物中的检测
食品的卫生质量不过关,会引起食品中有害微生物超标的问题,食品中比较常见的致病菌主要有沙门氏菌、大肠杆菌、布氏杆菌、金黄色葡萄球菌等[4]。在对食品中致病微生物进行检测的时候,生化鉴定分离是最常规的方法,但是该方法操作起来十分复杂,不仅特异性低下,而且灵敏度也不高,在提早预防与即时监测中的作用也十分有限。而使用胶体金免疫层析技术能够解决这些不足,可以实现对食品中致病微生物的快速检测。
2、胶体金免疫层析技术在食品中生物毒素、农药、兽药残留物中的检测
很多食品中都会有生物毒素、农药等的残余物质,对消费者的健康造成了很大的威胁。在食品中,其残留的农药、兽药等物质多是一种半抗原的小分子物质,在制备抗体的时候要将其和大分子蛋白进行偶联来制备人工抗原。
以黄曲霉毒素B1为例,这是寄生曲霉菌与黄曲霉菌的二次代谢产物,是一种毒性非常强烈的致癌物,其有着非常稳定的理化性质,会对食品造成严重的污染,使得消费者的身体健康受到了极大的威胁[5]。在2005年的时候,相关专家就是用竞争免疫层析技术对食品中的黄曲霉毒素B1进行了检测,将抗AFB1单克隆抗体作为金标抗体,检测带为黄曲霉毒素B1-牛血清蛋白,质控带为羊抗鼠IgG,最终得到试纸条。
3、胶体金免疫层析技术在食品中违禁药物中的检测
在食品行业中,一些食品经营者以牟取暴利为经营目的,为了让食用者对其生产的食品成瘾,无视国家的相关法律法规,将罂粟壳等违禁药物加到调料、火锅汤料等食品中,对消费者的健康造成了很大的危害。罂粟碱、吗啡、可卡因等是罂粟壳的主要成分,在判断食品中是否含有罂粟壳的时候,可以通过检测吗啡、罂粟碱等的成分来加以判断。罂粟壳的大部分成分也是一种小分子物质,因此就可以使用跟农药类似的检测方法来对其加以检测。
使用柠檬酸三钠还原法对胶体金进行制备,并将胶体金标记方法来检测出牛还和猪肉中的磺胺二甲嘧啶残留样本,样本中的磺胺二甲嘧啶检测上限为20μg/kg,将这种方法和高效液相色谱法运用在检测牛奶和猪肉样品中,试条检测范围之内得到的结果和HPLC结果一致,这一检测在10min完成。
结语:
综上可知,胶体金免疫层析技术作为一种新型的标记技术,其凭借着无污染、简便、快速、结果准确率高等众多优点,在社会众多行业中都得到了良好的应用。为了能够更好的满足免疫层析分析方法的多方面要求,让胶体金免疫层析技术在食品检测中发挥出更大的作用,在今后必须要加快提高检测的敏感度与特异性,推动免疫层析在食品检测行业中得到更加合理的应用。
参考文献
[1]祁光宇,智晓莹,任维维,黄银军,牟克斌,刘学荣,王宇,蒋韬. 胶体金免疫层析技术在动物源性食品中的应用[J]. 东北农业大学学报,2010,04:156-160.
[2]张道宏,李培武,张奇,张文,丁小霞,王秀嫔,姜俊. 污染粮油食品的主要真菌毒素及胶体金免疫层析技术在快速检测中的应用[J]. 中国油料作物学报,2010,04:577-582.
[3]李宏,付冠艳,付淑君,钟菲菲,刘佩,曾林,杨丽霞. 胶体金免疫层析技术在食源性致病菌快速检测中的应用[J]. 食品与机械,2013,03:261-264.
[4]李建武,宋春美,刘芳,吴淑燕,李浩林,刘程,邱实,曾海娟,吴嫚,刘箐. 免疫层析试纸技术及其在食品安全检测中的应用[J]. 食品科学,2014,08:36-41.
[5]汤轶伟,高子媛,魏立巧,李译,兰建兴,张德福,高雪,励建荣. 标记免疫层析技术在食品安全检测中应用进展[J]. 食品安全质量检测学报,2014,07:1913-1917.
关键词:胶体金免疫层析技术;食品检测;应用情况
食品问题一直都是社会的焦点问题,直接关系到人们生活的质量,为了保障食品的安全,针对食品安全的分析检测技术也得到了不断的开发与应用,胶体金免疫层析技术便是其中的代表之一。本文就是关于胶体金免疫层析技术在食品检测中应用情况的分析。
一、胶体金免疫层析技术的分析
胶体金是一种氯金酸的水溶液,在柠檬酸三钠、白磷等还原剂的作用下,氯金酸聚合成大小特定的金颗粒,再在静电的作用下形成一种稳定的胶体溶液。胶体金颗粒本身就具有高电子密度的特点,当其颗粒的聚集到达某一特定密度时,就会产生能够通过肉眼看见的粉红色斑点,这就是可以将其作为免疫层析试验指示物的原因[1]。不同的还原剂可以制作不同的胶体颗粒,并在食物检测中发挥出显著的效果。
二、胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用分析
胶体金免疫层析技术在医学领域中应用的是最多的,在食品检测行业中的应用是在近年来才出现的。从目前来看,胶体金免疫层析技术在食品检测行业中的应用主要是在食品质量控制领域与食品安全检测领域这两大领域中得到了大力的应用。
(一)胶体金免疫层析技术在食品质量控制领域中的应用分析
水分、脂肪、糖类、蛋白质、维生素、矿物质等是食品的主要成分,其中大部分成分都是有机高分子物质,可以使用免疫学方法对其进行检测。对于一些需要快速得到检测结果而不需要进行精确定量检测的成分分析而言,胶体金免疫层析技术是使用起来最为合理的一项技术,这类检测一般都只用进行半定量分析[2]。
例如通过SMZ—HAS免疫新西兰白兔制得抗体,选择胶体金来标记,包被在结合垫上。利用SMZ—OVA固相化在检测带之上,试纸条不存在质控带,样品中的SMA和SMZ—OVA竞争结合抗体,这种方法对于SMZ标准溶液的灵敏度可以超过50mg/ml,整个检测反应都是在10min内完成。
由于我国胶体金免疫层析技术在食品行业中的应用起步较晚,针对这一方面的研究暂时还比较缺乏,目前只涉及了保健食品的检测。比如对于牛初乳来说,其作为一种含有大量非营养性功能组分的物质,保健价值极高。但是在初乳中,IgG的含量与这些生物活性物质含量有着非常紧密的关系,并且还是一种正相关的关系。因此,在对牛初乳或者与牛初乳相关的制品的生物活性指标进行评价的时候,主要就是对其中的IgG含量进行检测[3]。
(二)胶体金免疫层析技术在食品安全检测领域中的应用分析
为了获得更多的经济利润,在食品行业中有一些不法商家通过不正当甚至违法的手段来生产与加工食品,使得食品安全问题愈来愈严重。胶体金免疫层析技术在操作起来十分简便,检测用时短,在现场进行操作的时候非常方便,能够为食品安全问题的现场执法带来很多科学依据。
1、胶体金免疫层析技术在食品有害微生物中的检测
食品的卫生质量不过关,会引起食品中有害微生物超标的问题,食品中比较常见的致病菌主要有沙门氏菌、大肠杆菌、布氏杆菌、金黄色葡萄球菌等[4]。在对食品中致病微生物进行检测的时候,生化鉴定分离是最常规的方法,但是该方法操作起来十分复杂,不仅特异性低下,而且灵敏度也不高,在提早预防与即时监测中的作用也十分有限。而使用胶体金免疫层析技术能够解决这些不足,可以实现对食品中致病微生物的快速检测。
2、胶体金免疫层析技术在食品中生物毒素、农药、兽药残留物中的检测
很多食品中都会有生物毒素、农药等的残余物质,对消费者的健康造成了很大的威胁。在食品中,其残留的农药、兽药等物质多是一种半抗原的小分子物质,在制备抗体的时候要将其和大分子蛋白进行偶联来制备人工抗原。
以黄曲霉毒素B1为例,这是寄生曲霉菌与黄曲霉菌的二次代谢产物,是一种毒性非常强烈的致癌物,其有着非常稳定的理化性质,会对食品造成严重的污染,使得消费者的身体健康受到了极大的威胁[5]。在2005年的时候,相关专家就是用竞争免疫层析技术对食品中的黄曲霉毒素B1进行了检测,将抗AFB1单克隆抗体作为金标抗体,检测带为黄曲霉毒素B1-牛血清蛋白,质控带为羊抗鼠IgG,最终得到试纸条。
3、胶体金免疫层析技术在食品中违禁药物中的检测
在食品行业中,一些食品经营者以牟取暴利为经营目的,为了让食用者对其生产的食品成瘾,无视国家的相关法律法规,将罂粟壳等违禁药物加到调料、火锅汤料等食品中,对消费者的健康造成了很大的危害。罂粟碱、吗啡、可卡因等是罂粟壳的主要成分,在判断食品中是否含有罂粟壳的时候,可以通过检测吗啡、罂粟碱等的成分来加以判断。罂粟壳的大部分成分也是一种小分子物质,因此就可以使用跟农药类似的检测方法来对其加以检测。
使用柠檬酸三钠还原法对胶体金进行制备,并将胶体金标记方法来检测出牛还和猪肉中的磺胺二甲嘧啶残留样本,样本中的磺胺二甲嘧啶检测上限为20μg/kg,将这种方法和高效液相色谱法运用在检测牛奶和猪肉样品中,试条检测范围之内得到的结果和HPLC结果一致,这一检测在10min完成。
结语:
综上可知,胶体金免疫层析技术作为一种新型的标记技术,其凭借着无污染、简便、快速、结果准确率高等众多优点,在社会众多行业中都得到了良好的应用。为了能够更好的满足免疫层析分析方法的多方面要求,让胶体金免疫层析技术在食品检测中发挥出更大的作用,在今后必须要加快提高检测的敏感度与特异性,推动免疫层析在食品检测行业中得到更加合理的应用。
参考文献
[1]祁光宇,智晓莹,任维维,黄银军,牟克斌,刘学荣,王宇,蒋韬. 胶体金免疫层析技术在动物源性食品中的应用[J]. 东北农业大学学报,2010,04:156-160.
[2]张道宏,李培武,张奇,张文,丁小霞,王秀嫔,姜俊. 污染粮油食品的主要真菌毒素及胶体金免疫层析技术在快速检测中的应用[J]. 中国油料作物学报,2010,04:577-582.
[3]李宏,付冠艳,付淑君,钟菲菲,刘佩,曾林,杨丽霞. 胶体金免疫层析技术在食源性致病菌快速检测中的应用[J]. 食品与机械,2013,03:261-264.
[4]李建武,宋春美,刘芳,吴淑燕,李浩林,刘程,邱实,曾海娟,吴嫚,刘箐. 免疫层析试纸技术及其在食品安全检测中的应用[J]. 食品科学,2014,08:36-41.
[5]汤轶伟,高子媛,魏立巧,李译,兰建兴,张德福,高雪,励建荣. 标记免疫层析技术在食品安全检测中应用进展[J]. 食品安全质量检测学报,2014,07:1913-1917.