正常人肝细胞cDNA文库的构建及应用分析

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目的利用Gubler-Hoffman法构建了正常人肝细胞的cDNA文库以筛选肝细胞内部与乙肝病毒感染相关的基因。方法 首先采用TRIzol法提取正常人肝细胞总RNA,纯化mRNA。逆转录合成单链cDNA,然后合成双链cDNA。用Spin Column回收0.4kb以上片段.然后与VectorpAP3neo进行连接,利用电刺激转化法导入E、coliDH10B,利用PCR法检测文库的重组效率。结果扩增后的文库重组率为93.3%。结论 已经成功地构建了正常人肝组织的cDNA文库,该文库可用于筛选与乙肝相关的基因
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