【摘 要】
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通过DEAE-Sepharose离子交换分段层析、DEAE-Sepharose离子交换梯度层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析三种方法的联用,从中华白玉蜗牛消化酶中提纯出一种β-葡萄糖苷酶。该酶
【机 构】
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大连医科大学微生物学教研室,中国科学院大连化学物理研究所药用资源开发研究组,大连医科大学寄生虫学教研室,
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通过DEAE-Sepharose离子交换分段层析、DEAE-Sepharose离子交换梯度层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析三种方法的联用,从中华白玉蜗牛消化酶中提纯出一种β-葡萄糖苷酶。该酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带。应用SDS-PAGE和凝胶过滤层析测定其分子量,提示该酶是由4个分子量为110~115 kD的相同亚基组成的同源四聚体。pNPG为底物的动力学参数Km和Vmax分别为0.182 mmol/L和0.189μmol/(min.mg)。
Through the combination of DEAE-Sepharose ion exchange fractionation, DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and Sephadex G-100 gel filtration chromatography, a β-glucose was purified from the Chinese white jade snail digestive enzyme Glycosidase. This enzyme appears as a single protein band on SDS-PAGE. Its molecular weight was determined by SDS-PAGE and gel filtration chromatography, suggesting that the enzyme is a homotetramer composed of four identical subunits with molecular weights of 110-115 kD. The kinetic parameters Km and Vmax of pNPG were 0.182 mmol / L and 0.189 μmol / (min.mg) respectively.
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