【摘 要】
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目的 优化乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件.方法 以乙型流感病毒感染无血清悬浮培养的MDCK细胞,对培养条件中的MOI(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、
【机 构】
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长春生物制品研究所,吉林长春,130012
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目的 优化乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件.方法 以乙型流感病毒感染无血清悬浮培养的MDCK细胞,对培养条件中的MOI(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7)、胰酶终浓度(2.5、5、7.5、10、15、20 μg/mL)、细胞接毒密度(50× 104、100×104、300×104、500×104、700× 104个/mL)及病毒收获时间(24、48、72、96、120 h)进行优化.同时对流感病毒在贴壁培养及无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖情况进行比较.结果 乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上最适增殖条件为:MOI为10-2、胰酶终浓度为10 μg/mL、细胞接毒密度为300×104个/mL、病毒收获时间为72 h.流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖的HA血凝滴度及病毒滴度(CCID50)均明显高于贴壁培养的MDCK细胞(P＜0.05).结论 优化了乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件,为后续采用生物反应器大规模生产流感疫苗奠定了基础.
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