山羊痘病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

来源 :山地农业生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lz274458795

【摘要】

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根据GenBank中山羊疽病毒（AY077835）gp063基因DNA序列，应用Beacon Designer 7．0软件，设计合成1对引物和1条TaqMan探针，同时制备含有靶DNA序列的pEASY—T1重组质粒标准品。通过引物

【作者】

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姚俊段国军陈官国彭海生鲁富有杨永军李华春

【机构】

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云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南省丽江市华坪县畜牧兽医站,云南省普洱市动物疫病预防控制中心

【出处】

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山地农业生物学报

【发表日期】

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2012年5期

【关键词】

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山羊痘病毒 TAQMAN 实时荧光定量PCR Goat pox virus TaqMan real-time fluorescence quantitativ

【基金项目】

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云南省科技厅农业科技创新工程（2008LA019）

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根据GenBank中山羊疽病毒（AY077835）gp063基因DNA序列，应用Beacon Designer 7．0软件，设计合成1对引物和1条TaqMan探针，同时制备含有靶DNA序列的pEASY—T1重组质粒标准品。通过引物、探针浓度的筛选及反应条件的优化，建立了山羊痘病毒TaqMan法实时荧光定量PCR。该方法组内和组间重复试验变异系数均低于2％，最低浓度检测极限值为1×100copies／μL，上机检测时间少于40min。运用该方法对不同时期流行于云南局部的山羊痘临床组织病料进行定量检

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