牙龈卟啉单胞菌菌毛质粒构建和蛋白纯化

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目的:构建牙龈卟啉单胞菌菌毛基因原核表达质粒,纯化菌毛融合蛋白。方法:提取牙龈卟啉单胞菌DNA,通过PCR法克隆菌毛基因,构建质粒并转化至感受态细胞中,选取最佳条件诱导融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶亲和层析法,纯化融合蛋白;免疫印迹法验证蛋白的准确性。结果:实验显示低温高浓度诱导12 h时构建的质粒融合蛋白表达量最多;免疫印迹法检测在预期大小处显示特异性印迹条带。结论:成功的获得了纯度较高的牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白。
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