冷冻前后人脐带间充质干细胞免疫抑制能力的比较

来源 :生物医学工程与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pyw520
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目的探讨冷冻对人脐带间充质干细胞(h UC-MSC)免疫调节功能的影响。方法对足月剖宫产新鲜脐带采用组织贴块法分离h UC-MSC,贴壁培养,传代纯化冷冻后,在体外将γ-干扰素(IFN-γ)刺激后新鲜和冻融h UC-MSC与混合淋巴细胞共培养,实验检测激活的新鲜和冻融h UC-MSC对混合淋巴细胞增殖抑制的变化。用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验和酶联免疫吸附分析(ELISA)实验检测激活后新鲜和冻融h UC-MSC基因吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)、转化生长因子β(TGF-β)、环氧合酶2(COX-2)m RNA和前列腺素E2(PGE2)的表达变化情况。结果 IFN-γ可以增强新鲜和冻融h UC-MSC对活化的人外周血单个核细胞(h PBMC)的增殖抑制能力,但冻融h UC-MSC对活化的h PBMC的增殖抑制能力明显弱于新鲜h UC-MSC增殖抑制能力(P<0.05)。IFN-γ刺激24 h后,上调新鲜和冻融h UC-MSC表达免疫抑制基因IDO m RNA和TGF-βm RNA,但冻融h UC-MSC表达免疫抑制基因IDO m RNA和TGF-βm RNA低于新鲜h UC-MSC(P<0.05)。IFN-γ刺激24 h后,h UC-MSC分泌PGE2具有降低趋势,并且冻融h UC-MSC分泌PGE2水平明显少于新鲜h UC-MSC的分泌水平(P<0.05)。IFN-γ刺激24 h后冻融h UC-MSC比新鲜h UC-MSC表达环氧合酶2(COX-2)明显降低(P<0.05),并且冻融h UC-MSC比新鲜h UC-MSC表达COX-2明显降低(P<0.05)。结论冷冻保存h UC-MSC免疫抑制潜能被保留,这些细胞保持其抑制混合淋巴细胞增殖的能力,但其激活的能力下降。
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