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通过X射线反复照射体外培养的Lewis肺癌细胞系(LLC),建立其放射抗拒细胞系(R-LLC),并比较两种细胞系间Survivin蛋白的表达及分泌细胞因子水平的差异。
方法应用6MV X射线反复照射Lewis肺癌细胞系,5 Gy/次,共6次,30 Gy。采用CCK-8实验及克隆形成实验测定两种细胞系的放射敏感性;Western blot法检测两种细胞系Survivin蛋白表达的差异;ELISA法检测两种细胞系培养液上清细胞因子TNF-α、IL-12的浓度。
结果R-LLC及LLC细胞系的平均致死剂量D0分别是(1.397±0.128)和(1.053±0.214)Gy,外推值N分别是2.680±1.179和4.149±0.785,Dq值分别为1.038和1.988 Gy,SF2值分别为0.353±0.092和0.682±0.092,显示了明显的辐射抗性;Western blot结果显示,R-LLC细胞株的Survivin蛋白表达水平较LLC细胞株升高,差异有统计学意义(t=15.310,P<0.05);ELISA结果显示,R-LLC细胞上清液TNF-ɑ和IL-12浓度较LLC细胞明显升高,差异有统计学意义(t=2.867和3.014,P<0.05)。
结论反复照射使肿瘤细胞获得了辐射抗性,同时又促进了Lewis肺癌细胞Survivin蛋白及细胞因子的表达,为放射增敏及肿瘤免疫相关的研究提供依据。