论文部分内容阅读
【目的】炭疽菌能够侵染茶树叶片并造成病叶干枯、脱落,论文旨在分离、鉴定中国主要茶区茶树炭疽病的病原菌,为茶树病害防治工作提供科学依据。【方法】利用单孢分离法对采自中国15省（市、自治区）茶区的茶树炭疽病病叶进行炭疽菌分离,并对其ITS、TUB2两个位点进行PCR扩增和测序,测序结果采用MEGA 6.0软件以邻接法（Neighbor-Joining,NJ）构建多基因位点系统发育树。对分离的菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（potato dextrose agar,PDA）上的形态特征进行描述。对龙井43和中茶108茶树品种叶片进行有伤和无伤处理后接种代表性菌株,测试其致病性。【结果】以茶树上分离的炭疽菌菌株的2个基因位点序列（ITS、TUB2）构建多基因位点系统发育树,Colletotrichum boninense CBS 123755作为外群,结果表明所有菌株聚为3支,其中45个菌株与C.camelliae聚为一族、28个与C.fructicola聚为一族、5个与C.siamense聚为一族,所有菌株均归属于C.gloeosporioides复合种,并且C.camelliae在中国茶区分布范围最广,为茶树炭疽菌的优势种。形态特征结果表明,C.camelliae在PDA培养基上生长速度平均11.8 mm·d-1,菌落白色,气生菌丝致密,绒毛状,中央凸起,边缘整齐;菌核、刚毛未见;分生孢子梗、产孢细胞未见;分生孢子透明,光滑,圆柱状,两端钝圆或基部渐尖,（8-15）μm×（3-6）μm;菌丝附着胞褐色,棍棒状,不规则状,有分枝,（8-10.5）μm×（6.5-8）μm;分生孢子附着胞未见。C.fructicola在PDA培养基上生长速率平均6.76 mm·d-1,菌落正面白色,背面中央褐色,边缘白色,气生菌丝致密,绒毛状;菌核、刚毛未见;分生孢子梗透明,有隔,具分枝,产孢细胞圆柱状,7-18μm,顶端直径1—2μm;分生孢子透明,圆柱状,两端钝圆,部分中部溢缩,（10-15）μm×（3-3.5）μm;菌丝附着胞深褐色,圆形,近圆形,不规则形,有分枝,（6.5-8）μm×（3.5-5.5）μm;分生孢子附着胞褐色或深褐色,圆形,（5-7）μm×（5-6.5）μm。C.siamense在PDA培养基上生长速率平均7.6 mm·d-1,菌落白色,气生菌丝致密,绒毛状;菌核、刚毛未见;分生孢子梗透明,有隔,具分枝;产孢细胞圆柱状,8—16μm,顶端直径1-2μm;分生孢子透明,圆柱形,梭形,两端钝圆,部分中部有溢缩,（9.5-13.5）μm×（3-3.5）μm;菌丝附着胞深褐色,球形,棒状,不规则形,（5-8）μm×（3-5.5）μm。致病性测试结果表明,C.camelliae能侵染龙井43品种茶树有伤叶片,但对龙井43无伤叶片和中茶108有伤、无伤叶片无致病性,而C.fructicola和C.siamense 2个种对2个品种茶树有伤、无伤叶片均无致病性。【结论】基于系统发育学和形态学结合的方法对中国15省（市、自治区）部分茶区茶树病叶病原菌鉴定,基本明确C.camelliae为中国茶树炭疽菌优势种。