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本研究旨在通过慢病毒介导的基因转移方法,使NIM细胞稳定过表达恤基因,观察过表达恤基因的NB4细胞在IL-3或GM-CSF作用下分化行为的改变,探讨垤基因与NB4细胞分化之间的关系。以本实验室前期构建的携带慨基因ORF的克隆质粒为模板,用带Pmel和BstBI酶切位点的引物PCR获得目的基因,酶切PCR产物,定向克隆至慢病毒载体pRRLSIN.cPPT.PGK/IRES/GFP.WPRE,构建合hβc基因的慢病毒载体,经酶切及测序鉴定其正确性,将构建好的重组质粒与包装质粒一起共转染293T细胞,收集培养液