无乳链球菌GlnR因子DNA结合位点预测及其突变基因的构建

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利用生物信息学的方法对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)GlnR因子与DNA结合的位点进行预测,筛选出GlnR因子中与DNA结合的关键位点的氨基酸残基R47和R48.然后利用重叠PCR的方法将glnR基因上的第139~144位上的碱基CGCCGC突变为GCGGCG,使其编码的2个精氨酸残基突变为丙氨酸残基,将突变基因片段TA克隆至PMD 18-T载体上进行测序验证.测序结果表明,利用重叠PCR成功突变了这6个碱基,为后续研究GlnR因子的突变位点对DNA结合的影响提供了参考.
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