【摘 要】
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【目的】构建非洲猪瘟病毒CAS19-01/2019株（GenBank登录号：MN172368.1）结构蛋白P72的合成肽疫苗，通过免疫小鼠评估合成肽疫苗的免疫效力。【方法】利用ProtParam、SOPMA等软件分析P72蛋白的理化性质与结构信息，通过ABCpred、SVMtrip、IEDB预测P72蛋白的T细胞与B细胞抗原表位，筛选出显著的表位多肽区域，合成多肽辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫小鼠，检测
【基金项目】
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国家自然科学基金（31960641）； 贵州省科技创新人才团队项目（黔科合平台人才[2019]5615）； 贵州省“百”层次创新型人才培养项目（黔科合人才[2016]4012）； 贵州省科技支撑计划（黔科合支撑[2017]2585、黔科合支撑[2017]2587）；
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【目的】构建非洲猪瘟病毒CAS19-01/2019株（GenBank登录号：MN172368.1）结构蛋白P72的合成肽疫苗，通过免疫小鼠评估合成肽疫苗的免疫效力。【方法】利用ProtParam、SOPMA等软件分析P72蛋白的理化性质与结构信息，通过ABCpred、SVMtrip、IEDB预测P72蛋白的T细胞与B细胞抗原表位，筛选出显著的表位多肽区域，合成多肽辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫小鼠，检测免疫组小鼠产生的特异性抗体、T淋巴细胞亚群、脾脏淋巴细胞增殖、细胞因子白介素4（IL-4）、IL-2、γ干扰素（IFN-γ）、免疫球蛋白（IgG）,从体液免疫与细胞免疫角度评估合成肽的免疫效力。【结果】综合分析得出P72蛋白是稳定性亲水蛋白，二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲分别占19.35%、5.42%、25.08%和50.15%。筛选出了P72蛋白的8个优势抗原表位，626-634、520-528、298-306、203-211位氨基酸处为T细胞抗原表位，587-606、232-251、110-129、39-58位氨基酸处为B细胞抗原表位。整合优势表位合成2个多肽P72-1与P72-2,首次免疫小鼠14 d时可检测到P72-1与P72-2的特异性抗体，首免后28 d达到最高值，其最高抗体效价分别为1∶25 600与1∶12 800;免疫后小鼠T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+显著上升（P<0.05）;脾脏淋巴细胞增殖试验结果显示，免疫组淋巴细胞数量均极显著升高（P<0.01）;细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ含量均极显著增加（P<0.01）。【结论】本研究成功研制2种合成肽疫苗，在免疫效力上P72-2高于P72-1,二者都能产生高水平的特异性抗体，刺激脾脏淋巴细胞增殖，诱导产生细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ,本研究为非洲猪瘟合成肽疫苗研制奠定技术基础。
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