梅毒螺旋体硫氧还原蛋白TP0100的原核表达和鉴定

来源 :检验医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaowangjianfeng

【摘要】

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目的构建梅毒硫氧还原蛋白TP0100基因的原核表达载体,在大肠埃希菌中表达重组蛋白,并评价其在梅毒血清学诊断中的价值。方法构建pET-28b-TP0100重组表达质粒,转化大肠埃希菌B

【作者】

：

林勇平俞辉刘忠民

【机构】

：

广州医学院第一附属医院检验科

【出处】

：

检验医学与临床

【发表日期】

：

2012年8期

【关键词】

：

梅毒硫氧还原蛋白 TP0100 原核表达

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目的构建梅毒硫氧还原蛋白TP0100基因的原核表达载体,在大肠埃希菌中表达重组蛋白,并评价其在梅毒血清学诊断中的价值。方法构建pET-28b-TP0100重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21（DE3）后诱导表达。经镍柱纯化,重组蛋白通过质谱和Western blot进行鉴定。以重组蛋白为抗原建立酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法,并检测临床收集的梅毒血清。结果成功构建表达载体pET-28b-TP0100,测序结果表明质粒中的插入序列与GenBank中TP0100的基因序列相同。重组蛋白表达约占菌体总蛋白

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