【摘 要】
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将鲑鱼降钙素前体多肽(sCTGly)基因克隆到表达载体pPIC9K上,然后转化毕赤酵母营养缺陷型菌株GS115,利用酿酒酵母分泌信号肽α-factor将目的产物分泌到发酵上清液中。经组氨酸
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
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将鲑鱼降钙素前体多肽(sCTGly)基因克隆到表达载体pPIC9K上,然后转化毕赤酵母营养缺陷型菌株GS115,利用酿酒酵母分泌信号肽α-factor将目的产物分泌到发酵上清液中。经组氨酸缺陷筛选、G418高拷贝筛选及摇瓶表达筛选,获得较高水平表达菌株GS115-sCTGly。酶联免疫反应检测上清液中酶的活性,表明sCTGly产量在10mg/L以上。通过5L发酵罐发酵条件优化,表达水平提高到200mg/L以上。
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