【摘 要】
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目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原产生的影响。方法:贴壁培养hUCMSCs,流式细胞术分析其表面标记(CD45、CD34、CD105
【机 构】
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暨南大学附属第一医院妇产科,温州医学院药学院生物制药系
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目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原产生的影响。方法:贴壁培养hUCMSCs,流式细胞术分析其表面标记(CD45、CD34、CD105、CD29和HLA-DR),成脂及成骨诱导其分化,以鉴定其为间充质干细胞,确定bFGF促增殖最适浓度为20μg/L。分为实验组和对照组,实验组添加bFGF(20μg/L)于DMED/F12培养液中,对照组使用DMED/F12常规培养液。MTT法测定hUCMSCs存活和增殖能力,分析bFGF对hUCMSCs增殖的影响,RT-PCR测定其Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的变化;West-ern blotting测定其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量。结果:MTT生长曲线提示bFGF促进hUCMSCs的增殖。用含与不含bFGF培养基培养的hUCMSCs均表达CD29,不表达CD34、CD45和HLA-DR,油红O染色和茜素红染色阳性。RT-PCR结果显示了实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较对照组减少(P<0.05)。Western blotting检测结果显示了实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达较对照组减少(P<0.05)。结论:bFGF可显著促进hUCMSCs增殖,且不改变细胞的表面标志物表达。bFGF对hUCMSCsⅠ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达呈抑制效应,提示其在促进创面愈合的同时可能不会引起Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白沉积,从而减少瘢痕增生。
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