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目的
观察金丝桃苷对人NK细胞体外增殖及杀伤胰腺癌PANC1细胞活性的影响,探讨其可能机制。
方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMCs),应用含IL-2的NK细胞培养液加不同浓度(0.3、1.6、8、40、200 μg/ml)的金丝桃苷溶液诱导PBMCs 12 d,以不加金丝桃苷作为对照组。采用台盼蓝染色观察细胞存活数;流式细胞术检测NK细胞表型及其穿孔素、颗粒酶B的表达,计算NK细胞增殖倍数;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞杀伤活性。
结果金丝桃苷各浓度组和对照组NK细胞含量均达到80%左右;NK细胞表型为CD3-CD56+,0.3、1.6、8 μg/ml金丝桃苷组NK细胞增殖倍数分别为(93.76±8.77)、(106.67±12.35)、(118.50±11.51)倍,显著高于对照组的(73.70±9.43)倍;1.6、8、40 μg/ml金丝桃苷组NK细胞穿孔素水平显著高于对照组[ (82.34±2.90)%、(89.15±3.54)%、(81.78±2.81)%比(72.93±2.06)% ];1.6、8 μg/ml金丝桃苷组NK细胞颗粒酶B水平显著高于对照组[(87.30±1.70)%、(92.16±3.05)%比(82.35±2.73)% ];1.6、8 μg/ml金丝桃苷组对PANC1细胞的杀伤活性显著高于对照组[(63.18±3.77)%、(65.34±4.97)%比(52.16±5.48)%],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。
结论金丝桃苷在一定浓度范围内可促进NK细胞增殖,并可能通过上调穿孔素和颗粒酶B的表达增强NK细胞对胰腺癌PANC1细胞的杀伤活性。