【摘 要】
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目的探讨低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸(2.5,5和10mmol·L-1)处理
【机 构】
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江苏大学医学院药理学系,江苏大学医学院基础医学与预防医学实验中心
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目的探讨低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸(2.5,5和10mmol·L-1)处理PC12细胞24 h诱导细胞损伤,采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度,采用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞内氧自由基水平,Hoechst 33258单荧光染色法观察细胞凋亡,免疫荧光染色法检测HIF-1α在细胞内的表达,免疫印迹法检测细胞HIF-1α、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated-Akt,pAkt)、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果喹啉酸可剂量依赖性地诱导PC12细胞损伤,导致细胞内氧自由基增多和细胞凋亡。同时,喹啉酸可使PC12细胞HIF-1α表达上调并聚集于核内;p-Akt表达增加,Bax/Bcl-2表达比例增加。结论 HIF-1α和Akt介导了喹啉酸诱导PC12的细胞凋亡;此外,氧化应激过程也可能参与了细胞损伤。
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