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目的探索简单、经济易行的大容量血样无菌分离外周血单个核细胞(PBMC)的方法。方法同时用新方法和经典的聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法分离同一份血样。配对t检验分析比较两种方法获取PBMC的数量。新方法采用先离心抗凝血,取出血浆与红细胞交界层,再用经典分离法分离交界层获得PBMC,余留抗凝血再次离心取出交界层并分离获取PBMC。结果新方法得到的PBMC总数不低于经典分离法(P>0.05)。结论该法能简单安全地从大量血样中无菌分离PBMC。