人CD40L胞外区腺病毒分泌表达载体的构建

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目的构建人CD40L胞外区单基因腺病毒分泌表达载体pAd-hCD40L,为进一步研究CD40,CD40L共刺激通路在免疫耐受中的作用奠定基础。方法用PCR法分别扩增人CD40L胞外区和致瘤素的分泌信号肽cDNA,通过PCR连接后将重组的cDNA扩增出来,导入pGEM T-Easy,经测序正确后转入AdEasy(tm)XL Adenoviral Vector System系统中,得到CD40L胞外区单基因腺病毒分泌表达载体。结果 核苷酸序列测定显示克隆基因的核苷酸及推导的氨基酸序列与文献报道一致,开放阅读框正确。结论人CD40L胞外区单基因腺病毒分泌表达载体构建成功。
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