【摘 要】
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为储备小反刍兽疫疫情防控技术,根据GenBank公布的小反刍兽疫病毒N基因序列设计合成特异性引物,以小反刍兽疫弱毒疫苗为材料,建立小反刍兽疫病毒一步法PT-PCR检测方法,并对所
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州省动物疫病预防控制中心,黔西南州疫病预防控制中心
【基金项目】
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黔西南州种草养羊产业发展省州科技合作专项(黔西南科合[2012]5号);贵州省自然科学技术基金(黔科合J字[2011]2332号);贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室培育项目(黔科合计Z字[2011]4008号)
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为储备小反刍兽疫疫情防控技术,根据GenBank公布的小反刍兽疫病毒N基因序列设计合成特异性引物,以小反刍兽疫弱毒疫苗为材料,建立小反刍兽疫病毒一步法PT-PCR检测方法,并对所建方法进行条件优化和性能评价。结果显示,建立的方法能有效扩增大小约447bp目的基因片段。该一步法RT-PCR最佳模板质量浓度为6.76×10^-3 g/L,最佳退火温度60℃。该一步法RT-PCR检测方法性能评价结果显示,其最小模板检出质量浓度为6.76×10^-6 g/L,且方法具良好的特异性和临床应用性,
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