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目的：对RP—HPLC法测定厦门市学龄前儿童CYP3A酶活性的色谱方案进行优化，建立最佳色谱的分离条件。方法：利用氢化可的松（HC）探针法，以高效液相色谱法（HPLC）测定尿液中6β羟基氢化可的松（6β-OHC）、氢化可的松的浓度，解析高效液相色谱法分离人尿样中内源性6β-羟基氢化可的松和氢化可的松3种不同色谱方法。结果：使用梯度洗脱法实验后得到的6β-弪基氢化可的松峰形尖锐且分离度较好。结论：HPLC测定6β-羟基氢化可的松和氢化可的松含量方法中梯度洗脱优于等度洗脱。