【摘 要】
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为了构建猪圆环病毒1型(PCV1)感染性DNA克隆,并为PCV1基因突变体的构建及PCV2的相关研究奠定基础,采用PCR方法从PCV1质粒中扩增出了PCV1全基因组片段,将其插入到pBluescript
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院; 新疆农业大学动物医学院;
【基金项目】
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北京市教委科技计划项目(KM200810020013);北京市自然科学基金项目(6082008)
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为了构建猪圆环病毒1型(PCV1)感染性DNA克隆,并为PCV1基因突变体的构建及PCV2的相关研究奠定基础,采用PCR方法从PCV1质粒中扩增出了PCV1全基因组片段,将其插入到pBluescriptⅡSK(+)载体中,构建了单拷贝PCV1DNA克隆,并进一步构建了双拷贝PCV1DNA克隆;将双拷贝PCV1DNA克隆转染入PK-15细胞以获得拯救病毒,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力和遗传稳定性。结果表明,成功获得了PCV1拯救病毒,并能够在PK-15细胞中进行稳定传代,其TCID50在连传5代后达到106.55/mL,与其亲本病毒相近,显示出较高的增殖能力。
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