【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-33a-3p(miR-33a-3p)对结直肠癌化疗耐药的影响及其调控机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌亲本株(HCT8)及耐药细胞株(HCT8/5-Fu及HCT8/DDP)中miR-33a-3p的表达.构建miR-33a-3p模拟物和阴性对照转染至结直肠癌耐药细胞后检测细胞增殖、凋亡、周期分布及化疗敏感性变化,运用生物信息学方法预测miR-33a-3p的靶基因,运用qRT-PCR和Western blot检测过表达miR-33a-3p对下游靶基因EphA2
【机 构】
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武汉科技大学医学院感染免疫与肿瘤微环境研究所,武汉 430081;武汉科技大学医学院感染免疫与肿瘤微环境研究所,武汉 430081;武汉科技大学职业危害识别与控制湖北省重点实验室,武汉 430081
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目的 探讨微小RNA-33a-3p(miR-33a-3p)对结直肠癌化疗耐药的影响及其调控机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌亲本株(HCT8)及耐药细胞株(HCT8/5-Fu及HCT8/DDP)中miR-33a-3p的表达.构建miR-33a-3p模拟物和阴性对照转染至结直肠癌耐药细胞后检测细胞增殖、凋亡、周期分布及化疗敏感性变化,运用生物信息学方法预测miR-33a-3p的靶基因,运用qRT-PCR和Western blot检测过表达miR-33a-3p对下游靶基因EphA2的影响.结果 结直肠癌耐药细胞系中miR-33a-3p的表达显著低于亲本株(均P<0.01).与阴性对照组相比,过表达miR-33a-3p的耐药细胞增殖能力降低,细胞凋亡增加,细胞于G2/M周期阻滞,化疗敏感性增强(均P<0.05).生物信息学预测结果显示EphA2可能为miR-33a-3p的下游靶基因.当过表达miR-33a-3p时,耐药细胞EphA2表达明显降低.结论 miR-33a-3p可能通过调控下游靶基因EphA2的水平逆转结直肠癌化疗耐药.
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