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目的:构建人血管抑素K1—3的重组酵母胞内表达质粒PHIL—D2/K1—3,获得重组目的蛋白。方法:从胎儿肝脏组织用RT—PCR方法扩增人血管抑素K1—3目的基因,克隆至酵母胞内表达质粒PHIL-D2中,线性化后转化到毕赤酵母GS115胞内,经PCR和Sourthera杂交筛选出阳性转化予,并用甲醇诱导表达。表达产物进行SDS—PAGE(12%)和Western blot检测,经赖氨酸亲和层析柱纯化后,用Lowry法测定蛋白含量,并进行生物活性测定。结果:SDS—PAGE和Western blot结果显示