目的建立测定牛肺表面活性提取物中多种四环素类抗生素残留的方法。方法采用UPLC-MS/MS方法,以Waters HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm）为固定相,分别以含0.1%甲酸的乙腈溶液和0.1%甲酸的水溶液为流动相A和流动相B,梯度洗脱,流速0.3 m L·min^-1,柱温30℃,进样量1μL。结果该方法能同时测定四环素、金霉素、土霉素、多西环素、美他环素、米诺环素、β-多西环素、差向四环素、差向金霉素、脱水四环素和脱水差向四环素等11种抗生素。各化合物线性范围、灵敏度、精密度、回收率均满足分析要求。在牛肺表面活性提取物中可检出土霉素和四环素,其中土霉素残留量约为0.03 mg·kg^-1,四环素则未达到定量限(0.006 mg·kg^-1)。结论该方法可作为检测牛肺表面活性提取物中四环素类抗生素残留的方法。