【摘 要】
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通过构建斜带石斑鱼垂体cDNA文库,克隆了其生长激素(GH)全长cDNA.斜带石斑鱼GH全长cDNA为955bp,编码的多肽为204 aa.应用PCR方法把编码GH成熟肽的cDNA片段克隆到表达载体pET-
【机 构】
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中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁育重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，广东省自然科学基金
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通过构建斜带石斑鱼垂体cDNA文库,克隆了其生长激素(GH)全长cDNA.斜带石斑鱼GH全长cDNA为955bp,编码的多肽为204 aa.应用PCR方法把编码GH成熟肽的cDNA片段克隆到表达载体pET-15b,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽.SDS-PAGE结果表明,0.4 mmol@L-1IPTG诱导表达的蛋白约为24 kDa,主要为不溶性的包含体.细菌裂解液沉淀溶于6 mol@L-1盐酸胍后,用Ni2+-NTA树脂进行亲和分离纯化,纯化产物在SDS-PAGE上表现为一条
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