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目的以pIRES为载体建立可同时独立表达Ag85A与ESAT6两种抗原的抗结核二价疫苗，探究疫苗剂量对质粒基因体外表达水平的影响。方法PCR扩增获得Ag85A基因和ESAT6基因，分别插入pIRES质粒的多克隆位点A和B，构建pIRES—Ag85A—ESAT6重组质粒。脂质体2000将重组质粒转入RAW264．7细胞系，Western blot法检测目的蛋白的表达水平。结果成功构建pIRES—Agg5A—ESAT6重组质粒，在转染后的RAW264．7细胞同时高表达Agg5A与ESAT6，其表达水平与转染的