【摘 要】
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目的:研究Mysm1-/-巨噬细胞对前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移的影响并进一步探讨其中的机制。方法:RTPCR检测巨噬细胞中Mysm1、iNOS、IL-1β和IL-13的相对表达水平的变化;用
【基金项目】
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黑龙江省教育厅项目基础研究,编号:2016-KYYWF-0601
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目的:研究Mysm1-/-巨噬细胞对前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移的影响并进一步探讨其中的机制。方法:RTPCR检测巨噬细胞中Mysm1、iNOS、IL-1β和IL-13的相对表达水平的变化;用流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞细胞的诱导分化和Mysm1-/-巨噬细胞对前列腺癌细胞周期的影响;细胞计数检测Mysm1-/-巨噬细胞对前列腺癌细胞的影响;凋亡试剂盒检测Mysm1-/-巨噬细胞对前列腺癌细胞凋亡的影响;划痕实验法检测Mysm1敲除的巨噬细胞对前列腺癌细胞迁移的影响;用MTT法检测Mysm1-/-的巨噬细胞对PC-3细胞的增殖抑制率。结果:WT和Mysm1-/-BMC在诱导5d后分化为巨噬细胞后用FCM检测显示两者之间无明显差距;通过RT-PCR证实Mysm1-/-的BMC中Mysm1的缺陷表达;WT和Mysm1-/-巨噬细胞在LPS刺激后用RT-PCR检测显示iNOS和IL-1βmRNA的表达量增高,但IL-13 mRNA无明显差距;细胞划痕和细胞计数实验结果显示Mysm1-/-M1型巨噬细胞分别对前列腺癌细胞的迁移和增殖能力的抑制作用明显高于WT组的,而M2型的无明显差异;FCM检测显示Mysm1-/-M1型巨噬细胞较WT组对前列腺癌细胞的周期更多的阻滞在G1期,而S期细胞比例减少,而M2型的无明显差异;MTT结果显示Mysm1-/-M1型巨噬细胞较WT组对前列腺癌细胞的活力抑制更显著,而M2型的无明显差异。结论:Mysm1-/-巨噬细胞抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移能力。
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