【摘 要】
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目的：构建4ARE强化的红、绿双荧光蛋白报告基因载体。方法：人工合成3对ARE序列，经退火和磷酸化后插入pARE-TK-GFP载体，构建成p4ARE-TK-GFP载体。以质粒pDsRed2-N1为模板，PCR扩增红
【机 构】
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扬州大学临床医学院肿瘤科,江苏省中西医结合老年病防治重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81303109);教育部博士点基金资助项目(编号:20113250120006);扬州市自然科学基金资助项目(编号:YZ2014047)
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目的：构建4ARE强化的红、绿双荧光蛋白报告基因载体。方法：人工合成3对ARE序列，经退火和磷酸化后插入pARE-TK-GFP载体，构建成p4ARE-TK-GFP载体。以质粒pDsRed2-N1为模板，PCR扩增红色荧光蛋白及其启动子序列与pMD18-T载体连接，构建成pMD-DsRed载体。用Ade I酶和BspT I酶对载体pMD-DsRed和p4ARE-TK-GFP进行双酶切，连接产物转化大肠埃希菌DH5α 感受态细胞后，挑取阳性克隆子进行质粒抽提酶切及测序鉴定。结果：经酶切及DNA测序证实，目的片
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